癌幹細胞マーカーの共発現は、膵臓腺癌における腫瘍形成誘発性発現プロファイルに対応しています

膵管腺癌（PDAC）は、依然として最も致命的な悪性腫瘍の1つです。その陰鬱な予後は、多くの場合、さまざまなマーカーを使用してPDACで特定された癌幹細胞（CSC）の存在に起因しています。ただし、これらすべてのマーカーの共発現はまだ評価されていません。さらに、PDAC腫瘍サンプルおよびそれらの腫瘍から直接由来する細胞株のCSCマーカーの発現レベルを比較する研究は不足しています。ここでは、推定CSCマーカー-CD24、CD44、上皮細胞接着分子（EPCAM）、CD133、およびネスチンごとの免疫蛍光、フローサイトメトリーおよび3つのPDAC由来細胞株におけるフローサイトメトリーおよび定量的PCRの発現を分析しました。腫瘍組織と比較してin vitro条件下で濃縮されたCD24およびCD44を除き、すべての細胞株と腫瘍サンプルの間で検査されたCSCマーカーの高発現を示しました。残りのマーカーの陽性細胞の割合は、対応する腫瘍で検出されたマーカーに匹敵しました。フローサイトメトリーを使用した共発現分析により、CD24+/CD44+/EPCAM+/CD133+細胞が細胞株の有意な集団（範囲、43〜72％）を表していることが明らかになりました。CD24+/CD44+/EPCAM+/CD133+細胞の最も高い割合は、生存期間が最も短い患者の腫瘍に由来する細胞株で検出されました。遺伝子発現プロファイリングを使用して、他の2つの細胞株のプロファイルと比較して、この細胞株の特定の腫瘍性促進性発現プロファイルをさらに特定しました。一緒に、CD24+/CD44+/EPCAM+/CD133+細胞は原発腫瘍に由来するPDAC細胞株に存在し、その割合の増加は腫瘍性遺伝子発現プロファイルに対応します。

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) remains one of the most lethal malignancies. Its dismal prognosis is often attributed to the presence of cancer stem cells (CSCs) that have been identified in PDAC using various markers. However, the co-expression of all of these markers has not yet been evaluated. Furthermore, studies that compare the expression levels of CSC markers in PDAC tumor samples and in cell lines derived directly from those tumors are lacking. Here, we analyzed the expression of putative CSC markers-CD24, CD44, epithelial cell adhesion molecule (EpCAM), CD133, and nestin-by immunofluorescence, flow cytometry and quantitative PCR in 3 PDAC-derived cell lines and by immunohistochemistry in 3 corresponding tumor samples. We showed high expression of the examined CSC markers among all of the cell lines and tumor samples, with the exception of CD24 and CD44, which were enriched under in vitro conditions compared with tumor tissues. The proportions of cells positive for the remaining markers were comparable to those detected in the corresponding tumors. Co-expression analysis using flow cytometry revealed that CD24+/CD44+/EpCAM+/CD133+ cells represented a significant population of the cells (range, 43 to 72%) among the cell lines. The highest proportion of CD24+/CD44+/EpCAM+/CD133+ cells was detected in the cell line derived from the tumor of a patient with the shortest survival. Using gene expression profiling, we further identified the specific pro-tumorigenic expression profile of this cell line compared with the profiles of the other two cell lines. Together, CD24+/CD44+/EpCAM+/CD133+ cells are present in PDAC cell lines derived from primary tumors, and their increased proportion corresponds with a pro-tumorigenic gene expression profile.