Rhizopus細胞壁を溶解するバチルスR-4のキトサナーゼの精製といくつかの酵素特性

Bacillus sp（Bacillus R-4）の株は、プロテアーゼとカルボヒドロラーゼを生成し、どちらも根茎細胞壁を溶解する能力を備えています。酵素のうち、カルボヒドラーゼは超遠心性および電気泳動的に均一な状態に精製され、キトサナーゼとして同定されています。酵素は、キトサンと同様にグリコールキトサンで活性でした。精製酵素の分子量は、31 000、等電点としてpH 8.30と推定されました。酵素は、根茎細胞壁またはグリコールキトサンのいずれかで、pH 5.6および40度Cで最も活性があり、3時間40度Cで4.5〜7.5の範囲で安定していました。この活性は、スルフヒドリル試薬によって失われ、l-cysteineのグルタチオンの減少によって復元されました。反応混合物の粘度の急激な減少は、この酵素によるキトサンの寄付切断を示唆しました。

A strain of Bacillus sp (Bacillus R-4) produces a protease and a carbohydrolase both of which have the ability to lyse Rhizopus cell walls. Of the enzymes, the carbohydrolase has been purified to an ultracentrifugally and electrophoretically homogeneous state, and identified as a chitosanase. The enzyme was active on glycol chitosan as well as chitosan. Molecular weight of the purified enzyme was estimated as 31 000 and isoelectric point as pH 8.30. The enzyme was most active at pH 5.6 and at 40 degrees C with either Rhizopus cell wall or glycol chitosan as substrate, and was stable over a range of pH 4.5 to 7.5 at 40 degrees C for 3 h. The activity was lost by sulfhydryl reagents and restored by either reduced glutathione of L-cysteine. An abrupt decrease in viscosity of the reaction mixture suggested an endowise cleavage of chitosan by this enzyme.