ラット網膜神経節細胞は、磁気細胞ソーターで濃縮された培養

磁気細胞ソーター（MACS）技術を適用して、培養用の網膜神経節細胞（RGC）を分離しました。RGCは、1.1'-ジオクタデシル-3,3,3 '、3'-テトラメチルインドカルボシアニン過塩素酸（DIL）で逆行的に標識されました。その後、網膜細胞懸濁液をビオチン化抗ラットTHY-1抗体およびMACSストレプトアビジンマイクロビーズとインキュベートし、磁場のカラムに適用しました。柱に付着した細胞を磁気なしでフラッシュアウトし、ガラスカバースリップにメッキしました。RGCは、磁気カラムに適用する前に、MACが0.55％のすべてのセルの31.0％に濃縮されました。希釈細胞の平均直径は、非標識細胞の平均直径よりも有意に大きかった。11 microMを超える相馬直径のすべての細胞に標識されました。実行可能なRGCの数は、X200の倍率で6つの培養物の10フィールドでカウントされました。2日目、7日目、14日目の平均数は、それぞれ53 +/- 3、24 +/- 2および21 +/- 3でした（平均+/- SEM、n = 6）。したがって、MACS技術は、RGCの濃縮と培養RGCの長期的な研究に役立つことが確認されました。

The magnetic cell sorter (MACS) technique was applied to isolate retinal ganglion cells (RGCs) for culture. RGCs were labeled retrogradely with 1.1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate (Dil). Subsequently retinal cell suspensions were incubated with biotinylated anti-rat Thy-1 antibody and MACS Streptavidin MicroBeads, and then applied onto the column in the magnetic fields. Cells attached on the column were flashed out without magnetism and plated on glass cover slips. RGCs were enriched to 31.0% of all cells with MACS from 0.55% before applying onto the magnetic column. Mean diameters of Dil-labeled cells were significantly larger than those of unlabeled cells. All cells with soma diameter over 11 microm were labeled. The number of viable RGCs were counted in the 10 fields of six cultures at a magnification of x200; the mean numbers on the 2nd, 7th and 14th culture-day were 53+/-3, 24+/-2 and 21+/-3, respectively (mean +/- SEM, n = 6). Thus, the MACS technique was confirmed to be useful for enrichment of RGCs and long-term study of cultured RGCs.