p53ノックアウトマウスからの不滅の茶色の脂肪細胞：分離タンパク質の分化と発現

茶色の脂肪組織（BAT）は、哺乳類の代謝熱産生の特定の部位です。新規不滅の茶色の脂肪細胞株を確立するために、前脂肪細胞を含む間質血管画分を、腫瘍抑制遺伝子P53を欠くマウスの皮膚間コウモリから得られました。暫定的にHB2細胞と名付けられたp53欠損細胞は、繰り返し継代後にin vitroで培養され、インスリン、T3および/またはトログリタゾンの存在下で脂肪細胞に分化し、脂肪細胞特異的遺伝子を発現し、総脂質液滴を蓄積します。茶色の脂肪細胞に特異的に存在するミトコンドリアタンパク質である分離タンパク質1（UCP1）のmRNAレベルは、HB2前脂肪細胞では検出できませんでしたが、脂肪分化後に増加しました。HB2脂肪細胞では、ベータアドレナリン受容体経路の刺激後にUCP1 mRNA発現が著しく活性化されました。UCP2およびUCP3のmRNAは、最近UCP1のアイソフォームにクローニングされたもので、HB2脂肪細胞でも検出されましたが、それらのレベルはアドレナリン作動性刺激の影響を受けませんでした。したがって、HB2細胞は、BATおよびUCP機能のin vitro研究に役立つと思われます。

Brown adipose tissue (BAT) is the specific site for metabolic heat production in mammals. To establish a novel immortal brown adipocyte cell line, the stromal-vascular fraction containing preadipocytes was obtained from interscapular BAT of mice deficient of a tumor-suppressor gene p53. The p53-deficient cells, tentatively named as HB2 cells, could be cultured in vitro after repeated passages and differentiated into adipocytes in the presence of insulin, T3 and/or troglitazone, expressing some adipocyte-specific genes and accumulating intracellular lipid droplets. The mRNA level of uncoupling protein 1 (UCP1), a mitochondrial protein specifically present in brown adipocytes, was undetectable in HB2 preadipocytes, but increased after adipose differentiation. In HB2 adipocytes, UCP1 mRNA expression was markedly activated after stimulation of the beta-adrenergic receptor pathway. The mRNA of UCP2 and UCP3, recently cloned isoforms of UCP1, were also detected in HB2 adipocytes, but their levels were not influenced by adrenergic stimulation. Thus HB2 cells seem useful for in vitro studies of BAT and UCP functions.