アポトーシスを調節できるカスパーゼ-9の内因性ドミナント陰性の短いアイソフォームの同定

あるいは、BCL-X、CED-4、ICH-1などの特定のアポトーシス調節因子のスプライシングアイソフォームは、アポトーシスの調節に反対の役割を果たすことが示されています。ここでは、カスパーゼ-9Bという名前の内因性の代替アイソフォームの識別について説明します。カスパーゼ-9Bという名前は、中央の大きなサブユニットカスパーゼドメインを欠いています。カスパーゼ-9Bは、PCRおよびmRNAおよびタンパク質レベルによって多くの細胞株で検出可能です。カスパーゼ-9Bは、APAF-1のカスパーゼリクルートメントドメインと相互作用することができ、カスパーゼ-9の活性部位変異体と同様に、死受容体のオリゴマー化によって引き起こされるものを含む、複数の形態のアポトーシスを阻害することができます。また、in vitroシトクロムC依存性カスパーゼ活性化アッセイでAPAF-1によるカスパーゼ-9および-3の活性化をブロックすることもできます。これらの結果は、カスパーゼ-9Bが、機能性APAF-1-Caspase-9複合体の形成を妨げることにより、内因性アポトーシス阻害分子として機能することを示唆しています。

Alternatively spliced isoforms of certain apoptosis regulators, such as Bcl-x, Ced-4, and Ich-1, have been shown to play opposing roles in regulating apoptosis. Here, we describe the identification of an endogenous alternatively spliced isoform of caspase-9, named caspase-9b, which lacks the central large subunit caspase domain. Caspase-9b is detectable in many cell lines by PCR and at the mRNA and protein levels. Caspase-9b can interact with the caspase recruitment domain of Apaf-1, and like the active site mutant of caspase-9, it can inhibit multiple forms of apoptosis, including those triggered by oligomerization of death receptors. It can also block activation of caspase-9 and -3 by Apaf-1 in an in vitro cytochrome c-dependent caspase activation assay. These results suggest that caspase-9b functions as an endogenous apoptosis inhibitory molecule by interfering with the formation of a functional Apaf-1-caspase-9 complex.