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ほとんどの原核生物におけるプリン経路における4-カルボキシ-5-アミノイミダゾールリボヌクレオチド(CAIR)の形成には、ATP、HCO3-、アミノイミダゾールリボヌクレオチド(AIR)、および遺伝子産物がpurkおよびpureが必要です。PURKは、ATPとHCO3-の両方を必要とする反応で、空気のN5-カルボキシアミノイミダゾールリボヌクレオチド(N5-CAIR)への変換を触媒します。純粋なN5-cairの異常な再配置をCAIRに触媒します。この再配置のメカニズムを調査するために、[4,7-13C] -N5-CAIRおよび[7-14C] -N5-CAIRを合成し、ATP、アスパラギン酸、および4-(N-)の存在下で純粋に純粋にインキュベートしました。コキノカルボキサミド)-5-アミノイミダゾールリボヌクレオチド(SAICAR)シンテターゼ(PURC)。生成されたSAICARは、それぞれNMR分光法またはシンチレーションカウントによって分離され、分析されました。純粋な反応の可逆性のために、SAICARとしてのCAIRのPURCトラップが必要でした。両方の実験の結果は、N5-CAIRのカルバメートのカルボキシレート基が直接転送され、溶液中のCO2/HCO3-との平衡なしにCAIRを生成することが明らかになっています。これらの結果の純粋なみの(CO2および空気要望)エアカルボキシラーゼと比較して、これらの結果の機械的意味について説明します。
ほとんどの原核生物におけるプリン経路における4-カルボキシ-5-アミノイミダゾールリボヌクレオチド(CAIR)の形成には、ATP、HCO3-、アミノイミダゾールリボヌクレオチド(AIR)、および遺伝子産物がpurkおよびpureが必要です。PURKは、ATPとHCO3-の両方を必要とする反応で、空気のN5-カルボキシアミノイミダゾールリボヌクレオチド(N5-CAIR)への変換を触媒します。純粋なN5-cairの異常な再配置をCAIRに触媒します。この再配置のメカニズムを調査するために、[4,7-13C] -N5-CAIRおよび[7-14C] -N5-CAIRを合成し、ATP、アスパラギン酸、および4-(N-)の存在下で純粋に純粋にインキュベートしました。コキノカルボキサミド)-5-アミノイミダゾールリボヌクレオチド(SAICAR)シンテターゼ(PURC)。生成されたSAICARは、それぞれNMR分光法またはシンチレーションカウントによって分離され、分析されました。純粋な反応の可逆性のために、SAICARとしてのCAIRのPURCトラップが必要でした。両方の実験の結果は、N5-CAIRのカルバメートのカルボキシレート基が直接転送され、溶液中のCO2/HCO3-との平衡なしにCAIRを生成することが明らかになっています。これらの結果の純粋なみの(CO2および空気要望)エアカルボキシラーゼと比較して、これらの結果の機械的意味について説明します。
Formation of 4-carboxy-5-aminoimidazole ribonucleotide (CAIR) in the purine pathway in most prokaryotes requires ATP, HCO3-, aminoimidazole ribonucleotide (AIR), and the gene products PurK and PurE. PurK catalyzes the conversion of AIR to N5-carboxyaminoimidazole ribonucleotide (N5-CAIR) in a reaction that requires both ATP and HCO3-. PurE catalyzes the unusual rearrangement of N5-CAIR to CAIR. To investigate the mechanism of this rearrangement, [4,7-13C]-N5-CAIR and [7-14C]-N5-CAIR were synthesized and separately incubated with PurE in the presence of ATP, aspartate, and 4-(N-succinocarboxamide)-5-aminoimidazole ribonucleotide (SAICAR) synthetase (PurC). The SAICAR produced was isolated and analyzed by NMR spectroscopy or scintillation counting, respectively. The PurC trapping of CAIR as SAICAR was required because of the reversibility of the PurE reaction. Results from both experiments reveal that the carboxylate group of the carbamate of N5-CAIR is transferred directly to generate CAIR without equilibration with CO2/HCO3- in solution. The mechanistic implications of these results relative to the PurE-only (CO2- and AIR-requiring) AIR carboxylases are discussed.
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