in vitroでのクロピドグレルによるADP誘導血小板凝集の特異的阻害

1.チエノピリジンクロピドグレルは、ADP誘発性血小板凝集Ex vivoの特異的阻害剤です。in vitroでの血小板凝集に対するクロピドグレル（<OR = 100 microM）の直接的な影響はこれまでに説明されていません。2.クロピドグレルのin vitroでの抗凝集効果（タービジメトリ）の可能性を、ヒト血小板に富む血漿および洗浄した血小板で研究されました。3.血小板に富む血漿とクロピドグレル（<OR = 100 microM）と最大8時間インキュベートしても、ADP（6 microM）誘導血小板凝集の阻害はありませんでした。4.洗浄した血小板のクロピドグレルとのインキュベーションは、ADP（6 microM）誘導血小板凝集の時間（30分後の最大効果）および濃度依存性（IC50 1.9 +/- 0.3マイクローム）阻害をもたらしました。クロピドグレル（30ミクロム）は、コラーゲン（2.5マイクログml（-1）） - 、U46619（1 microM） - またはトロンビン（0.1 U ml（-1）） - 誘導血小板凝集を阻害しませんでした。クロピドグレル（30 microM）によるADP誘導凝集の阻害は、ADP作用の非平衡拮抗作用を示す克服できないものでした。RエナンチオマーSR 25989 C（30ミクロム）は、血小板凝集の阻害においてクロピドグレル（30ミクロム）よりも有意に活性が低かった（32 +/- 5％vs 70 +/- 1％阻害、p <0.05、n = 5）。5.洗浄された血小板では、クロピドグレル（<OR = 30 microM）は、ADP（6 microM）によるプロスタグランジンE1（1 microM）誘導血小板環状アンプ形成の阻害を有意に逆転させませんでした。6.クロピドグレルの抗凝集効果は、化合物を血小板懸濁液から除去したときに変更されませんでした。しかし、アルブミン（350 mg ml（-1））が試験バッファーに存在すると、クロピドグレルによる血小板阻害は完全に廃止されました。7.クロピドグレルは、肝生物活性化なしにin vitroで洗浄した血小板のADP誘導凝集を特異的に阻害すると結論付けられています。in vitroでのクロピドグレルによるADP誘発性血小板凝集の阻害は、ADPによるPGE1刺激環状AMPの反転に対する測定可能な効果がない場合に発生します。

1. The thienopyridine clopidogrel is a specific inhibitor of ADP-induced platelet aggregation ex vivo. No direct effects of clopidogrel (< or = 100 microM) on platelet aggregation in vitro have been described so far. 2. Possible in vitro antiaggregatory effects (turbidimetry) of clopidogrel were studied in human platelet-rich plasma and in washed platelets. 3. Incubation of platelet-rich plasma with clopidogrel (< or = 100 microM) for up to 8 h did not result in any inhibition of ADP (6 microM)-induced platelet aggregation. 4. Incubation of washed platelets with clopidogrel resulted in a time- (maximum effects after 30 min) and concentration-dependent (IC50 1.9+/-0.3 microM) inhibition of ADP (6 microM)-induced platelet aggregation. Clopidogrel (30 microM) did not inhibit collagen (2.5 microg ml(-1))-, U46619 (1 microM)- or thrombin (0.1 u ml(-1))-induced platelet aggregation. The inhibition of ADP-induced aggregation by clopidogrel (30 microM) was insurmountable indicating a non-equilibrium antagonism of ADP actions. The R enantiomer SR 25989 C (30 microM) was significantly less active than clopidogrel (30 microM) in inhibiting platelet aggregation (32+/-5% vs 70+/-1% inhibition, P < 0.05, n = 5). 5. In washed platelets, clopidogrel (< or = 30 microM) did not significantly reverse the inhibition of prostaglandin E1 (1 microM)-induced platelet cyclic AMP formation by ADP (6 microM). 6. The antiaggregatory effects of clopidogrel were unchanged when the compound was removed from the platelet suspension. However, platelet inhibition by clopidogrel was completely abolished when albumin (350 mg ml(-1)) was present in the test buffer. 7. It is concluded that clopidogrel specifically inhibits ADP-induced aggregation of washed platelets in vitro without hepatic bioactivation. Inhibition of ADP-induced platelet aggregation by clopidogrel in vitro occurs in the absence of measurable effects on the reversal of PGE1-stimulated cyclic AMP by ADP.