シナプス後アルファ - ネオロトキシン遺伝子の吐き出しコブラ、Naja Naja Sputatrix：構造、組織、および系統解析

吐き出しコブラの毒、Naja Naja Sputatrixには、ホスホリパーゼA2（PLA2）およびカルディオ酸（CTX）に加えて、非常に強力なα-ネウロトキシン（NTXS）が含まれています。この研究では、単一の唾を吐くコブラの毒における3つのアイソフォームのアルファ-NTXの合成に関与する3つの遺伝子の完全な特性評価を報告します。長距離ポリメラーゼ連鎖反応（LD-PCR）およびゲノムウォーキングによるDNA増幅により、プロモーターと5 'および3' UTRを含む遺伝子構造に関する情報が提供されています。各NTXアイソフォームのサイズは約4 kbで、3つのエクソンと2つのイントロンが含まれています。これらのアイソフォーム間の配列相同性は99％であることがわかりました。2つの可能な転写部位がプライマー拡張分析によって特定され、それらは+1および-45の位置でアデニン（A）ヌクレオチドに対応しました。プロモーターには、2つのTATAボックスとCCAATボックスも含まれています。転写因子AP-2およびGATAの推定結合部位も存在します。N. nのNTX遺伝子アイソフォーム間で観察される類似性の高い割合。Sputatrixおよび他の陸ヘビのAlpha-NTXおよびKappa-NTX遺伝子と同様に、NTX遺伝子がおそらく共通の祖先遺伝子から進化したことを示唆しています。

The venom of the spitting cobra, Naja naja sputatrix contains highly potent alpha-neurotoxins (NTXs) in addition to phospholipase A2 (PLA2) and cardiotoxin (CTX). In this study, we report the complete characterization of three genes that are responsible for the synthesis of three isoforms of alpha-NTX in the venom of a single spitting cobra. DNA amplification by long-distance polymerase chain reaction (LD-PCR) and genome walking have provided information on the gene structure including their promoter and 5' and 3' UTRs. Each NTX isoform is approximately 4 kb in size and contains three exons and two introns. The sequence homology among these isoforms was found to be 99%. Two possible transcription sites were identified by primer extension analysis and they corresponded to the adenine (A) nucleotide at positions +1 and -45. The promoter also contains two TATA boxes and a CCAAT box. Putative binding sites for transcriptional factors AP-2 and GATA are also present. The high percentage of similarity observed among the NTX gene isoforms of N. n. sputatrix as well as with the alpha-NTX and kappa-NTX genes from other land snakes suggests that the NTX gene has probably evolved from a common ancestral gene.