BALB/C胚性幹細胞を使用したトランスジェニックBALB/Cマウスの効率的な生成

BALB/Cは、免疫学で最も広く使用され、最も特徴づけられたマウス株の1つです。さまざまな用途では、BALB/Cトランスジェニックマウスを生成する必要があります。ただし、従来のマイクロインジェクション技術を使用すると、1細胞期のBALB/C胚は核外DNAマイクロインジェクションに対して非常に脆弱であるため、トランスジェニックBALB/Cマウスを生成することは非常に非効率的です。この問題を克服するために、BALB/C胚性幹細胞のトランスフェクションを介してEGR-1（早期成長応答遺伝子）トランスジェニックマウスの生成を調査しました。免疫グロブリン重鎖またはMHCクラスIIプロモーター/エンハンサーシステムのいずれかを含むEGR-1コンストラクトを運ぶトランスフェクタントをC57BL/6宿主の胚盤胞に注入し、キメラマウスを引き起こしました。両方のタイプの発現ベクターについて、生殖細胞系キメラのトランスジェニック子孫は、B細胞を含むリンパ組織で組換えEGR-1を発現しました。これは、トランスフェクトされたES細胞を使用したEGR-1トランスジェニックBALB/Cマウスの成功した生成を示しています。

BALB/c is one of the most widely used and best characterized mouse strains in immunology. For various applications, it is necessary to generate BALB/c transgenic mice. However, using the conventional microinjection technique it is extremely inefficient to produce transgenic BALB/c mice since the one-cell stage BALB/c embryos are highly vulnerable to pronuclear DNA microinjection. To overcome this problem, we have investigated the generation of Egr-1 (early growth response gene) transgenic mice via the transfection of BALB/c embryonic stem cells. Transfectants carrying Egr-1 constructs comprising either the immunoglobulin heavy chain or the MHC class II promoter/enhancer system were injected into C57BL/6 host blastocysts resulting in chimeric mice. For both type of expression vectors, transgenic offspring of the germline chimeras expressed recombinant Egr-1 in lymphoid tissues containing B cells. This demonstrates the successful generation of Egr-1 transgenic BALB/c mice using transfected ES cell.