アフィニティクロマトグラフィー：臨床応用のレビュー

アフィニティクロマトグラフィーは、サンプル成分の分離と特定の分析のために生物学的な相互作用を利用する液体クロマトグラフィーの一種です。このレビューでは、アフィニティクロマトグラフィーの基本原理について説明し、HPLCベースの方法に重点を置いて、臨床サンプルのテストでの使用を調べます。このアプローチの従来の応用には、ボロネート、レクチン、プロテインAまたはプロテインGの使用、および溶質の直接的な定量化のための免疫親和性サポートが含まれます。オンラインまたはオフラインのサンプル抽出に抗体ベースのカラムを使用する新しい技術は、逆相液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、毛細血管電気泳動など、他の分析方法と組み合わせてアフィニティクロマトグラフィーを使用する方法と同様に、詳細に調べられます。。間接的な分析物検出方法は、フローベースの免疫測定法を実行するために免疫親和性クロマトグラフィーを使用していることも説明されています。レビューされた他の用途には、アフィニティベースのキラル分離と、結合タンパク質との薬物またはホルモン相互作用の研究のためのアフィニティクロマトグラフィーの使用が含まれます。タンデム親和性方法や合成染料の使用、固定化された金属イオン、分子の刷り込み、または臨床分析物の親和性リガンドとしてのアプタマーなど、将来の発展の可能性のある領域が考慮されます。

Affinity chromatography is a type of liquid chromatography that makes use of biological-like interactions for the separation and specific analysis of sample components. This review describes the basic principles of affinity chromatography and examines its use in the testing of clinical samples, with an emphasis on HPLC-based methods. Some traditional applications of this approach include the use of boronate, lectin, protein A or protein G, and immunoaffinity supports for the direct quantification of solutes. Newer techniques that use antibody-based columns for on- or off-line sample extraction are examined in detail, as are methods that use affinity chromatography in combination with other analytical methods, such as reversed-phase liquid chromatography, gas chromatography, and capillary electrophoresis. Indirect analyte detection methods are also described in which immunoaffinity chromatography is used to perform flow-based immunoassays. Other applications that are reviewed include affinity-based chiral separations and the use of affinity chromatography for the study of drug or hormone interactions with binding proteins. Some areas of possible future developments are then considered, such as tandem affinity methods and the use of synthetic dyes, immobilized metal ions, molecular imprints, or aptamers as affinity ligands for clinical analytes.