大腸菌のグループIIイントロンスプライシング：CIS作用変異の表現型は、オルガネラRNA処理で観察されたスプライシング欠陥に似ています

緑藻Scenedesmus 'Lsurrna遺伝子からのミトコンドリア群IIB Intron Ri1は、ベータガラクトシダーゼをコードするLACZ遺伝子に導入されました。組換えLACZ遺伝子の大腸菌へのDNAを介した形質転換後、in vivoでキメラ前駆体RNAの正しいスプライシングを観察しました。in vitroでの自己触媒の自己分割とは対照的に、in vivoでのイントロン処理は成長温度とは無関係であり、E.coliでは、トランス作動因子がグループIITRONスプライシングに関与していることを示唆しています。このようなシステムは、原核生物の宿主でイントロン処理を分析するためのモデルとして適しているように思われます。イントロンスプライシングに対するCISミューティングの効果をさらに研究するために、E.coliで異なるRi1変異体を（そのスプライシング活性に関して）分析しました。これらの大腸菌イントロンスプライシング変異体の表現型は、RI1のオルガラスプライシング中に観察できるものと同一でしたが、それらはin vitroの自己分割実験で観察されたものとは異なります。したがって、オルガネラと原核生物の両方で、同様のスプライシング因子または同様の機能を示すトランス作動因子のいずれかがスプライシングに関与している可能性があります。最近の水平移動を介して、ユビキタストランス作用因子がグループIIイントロンの拡大に貢献したと推測します。

The mitochondrial group IIB intron rI1, from the green algae Scenedesmus obliquus ' LSUrRNA gene, has been introduced into the lacZ gene encoding beta-galacto-sidase. After DNA-mediated transformation of the recombinant lacZ gene into Escherichia coli, we observed correct splicing of the chimeric precursor RNA in vivo. In contrast to autocatalytic in vitro self-splicing, intron processing in vivo is independent of the growth temperature, suggesting that in E.coli, trans -acting factors are involved in group II intron splicing. Such a system would seem suitable as a model for analyzing intron processing in a prokaryotic host. In order to study further the effect of cis -mutations on intron splicing, different rI1 mutants were analyzed (with respect to their splicing activity) in E.coli. Although the phenotypes of these E. coli intron splicing mutants were identical to those which can be observed during organellar splicing of rI1, they are different to those observed in in vitro self-splicing experiments. Therefore, in both organelles and prokaryotes, it is likely that either similar splicing factors or trans -acting factors exhibiting similar functions are involved in splicing. We speculate that ubiquitous trans -acting factors, via recent horizontal transfer, have contributed to the spread of group II introns.