心肥大のメディエーターであるヒト筋炎/V-1タンパク質をコードする遺伝子のcDNA配列と特性評価

主に心筋細胞の肥大の結果として、心臓負荷の増加に対する心臓の主な反応は、主に心室肥大の発達です。心筋細胞肥大に関与する分子メカニズムと要因はよく理解されていません。ミオトロフィンは、心肥大に関連し、誘導することができる因子として最近関与した新しい12キロダルトンタンパク質です。ラットミオトロフィンのクローニングは、このタンパク質が機能的に定義されていないラット、マウス、鶏V-1タンパク質と同一であることを明らかにしました。ヒト筋炎は均一性に精製されていますが、その遺伝子は特徴付けられていません。このレポートでは、筋小剤/V-1タンパク質のヒトホモログのクローニング、発現、精製、特性評価について説明します。シーケンス分析指標ヌクレオチドレベルとアミノ酸レベルの両方でのすべての種の間の高い相同性（> 90％）、および多様な種のゲノムDNAのサザンブロット分析は、ミオトロフィン/V-1が高度に保存された遺伝子であることを確認します。北部分析は、単一のヒト転写産物の広範な発現を示しており、ドットブロット分析による50のヒト組織におけるmRNA分布の検査は、成体および胎児の心臓に比較的高い発現を伴うユビキタスな発現を示しています。組換えヒト筋炎が心筋細胞肥大を産生することを確認し、筋菌/V-1タンパク質mRNAのレベルの上昇がヒト拡張心筋症の心臓で発現することを初めて実証します。筋細胞菌の発現は虚血性心臓で上昇し、筋小剤発現が誘導された右心室肥大の低酸素ラットモデルの心室腫瘤と正の相関があるという新しい発見を報告します。

The predominant response of the heart to sustained increased work load is development of ventricular hypertrophy, principally as a result of hypertrophy of cardiomyocytes. The molecular mechanisms and factors involved in cardiomyocyte hypertrophy are poorly understood. Myotrophin is a novel 12-kilodalton protein recently implicated as a factor associated with and able to induce cardiac hypertrophy. Cloning of rat myotrophin revealed that this protein is identical to the functionally undefined rat, murine and chicken V-1 proteins. Although human myotrophin has been purified to homogeneity, its gene has not been characterized. In this report we describe the cloning, expression, purification and characterization of the human homolog of myotrophin/V-1 protein. Sequence analysis indicators high homology (>90%) between all species at both the nucleotide and amino acid levels, and Southern blot analysis of genomic DNA from diverse species verifies that myotrophin/V-1 is a highly conserved gene. Northern analysis indicates wide-spread expression of a single human transcript, and examination of mRNA distribution in 50 human tissues by dot blot analysis indicates ubiquitous expression with relatively high expressioon in adult and fetal heart. We verify that recombinant human myotrophin produces cardiomyocyte hypertrophy, and we demonstrate for the first time that elevated levels of myotrophin/V-1 protein mRNA are expressed in human dilated cardiomyopathic hearts. We report the novel findings that myotrophin expression is elevated in ischemic hearts, and that myotrophin expression correlates positively with ventricular mass in a hypoxic rat model of induced right ventricular hypertrophy.