出芽酵母Bub2は、紡錘体の極体に局在しており、mad2との異なる経路を介して有糸分裂チェックポイントを活性化します

有糸分裂チェックポイントは、有糸分裂紡錘体上の染色体の整列の間違いがある場合に、後期の前の細胞周期の進行をブロックします。出芽酵母では、MAD1、2、3、およびBub1、2、3タンパク質がこの逮捕を媒介します。MAD1、2、3、およびBub1の脊椎動物のホモログは、PDS1やB型サイクリンなどのANASASE阻害剤のCDC20/APC媒介タンパク質分解を阻害することにより、不動の動原体に結合し、有糸分裂による進行を防ぎます。出芽酵母の有糸分裂チェックポイントにおけるBUB2の役割を調査しました。次の観察結果は、Bub2とMad1、2がおそらく異なる経路を介してチェックポイントを活性化することを示しています。（a）他のMADタンパク質とは異なり、BUB2は細胞周期全体でスピンドルポールボディ（SPB）に局在します。（b）Nocodazole処理MAD1 BUB2およびMAD2 BUB2二重変異体は、どちらかの単一変異体よりも迅速かつ効率的にDNAを再現しているため、併用のMAD1またはMAD2およびBUB2の欠如の効果は加法です。（c）ノコダゾールの存在下でのBub2細胞の細胞周期の進行には、CDC26 APCサブユニットが必要であり、逆に同じ条件のMAD2細胞には必要ありません。全体として、我々のデータは、有糸分裂チェックポイントの活性化が、独立した部分的に冗長なメカニズムによる有糸分裂を介した進行をブロックすることを示唆しています。

The mitotic checkpoint blocks cell cycle progression before anaphase in case of mistakes in the alignment of chromosomes on the mitotic spindle. In budding yeast, the Mad1, 2, 3, and Bub1, 2, 3 proteins mediate this arrest. Vertebrate homologues of Mad1, 2, 3, and Bub1, 3 bind to unattached kinetochores and prevent progression through mitosis by inhibiting Cdc20/APC-mediated proteolysis of anaphase inhibitors, like Pds1 and B-type cyclins. We investigated the role of Bub2 in budding yeast mitotic checkpoint. The following observations indicate that Bub2 and Mad1, 2 probably activate the checkpoint via different pathways: (a) unlike the other Mad and Bub proteins, Bub2 localizes at the spindle pole body (SPB) throughout the cell cycle; (b) the effect of concomitant lack of Mad1 or Mad2 and Bub2 is additive, since nocodazole-treated mad1 bub2 and mad2 bub2 double mutants rereplicate DNA more rapidly and efficiently than either single mutant; (c) cell cycle progression of bub2 cells in the presence of nocodazole requires the Cdc26 APC subunit, which, conversely, is not required for mad2 cells in the same conditions. Altogether, our data suggest that activation of the mitotic checkpoint blocks progression through mitosis by independent and partially redundant mechanisms.