英国で分離された高レベルのゲンタマイシン耐性腸球菌の臨床分離株におけるTN5281様要素のプラスミドの不均一性と同定

英国全土の6つの病院から収集された高レベルのゲンタマイシン耐性（HLGR）腸球菌糞便の10の臨床分離株を研究して、HLGRが単一プラスミドの広範な普及に起因するかどうか、または異なるプラスミドタイプが普及に関連しているかどうかを判断しました。この表現型。HLGRは、AAC6'-APH2 "二機能性アミノグリコシド修飾酵素の存在に起因していました。AAC6'-APH2"遺伝子は、10個の分離株すべてで70 kbプラスミドに存在しました。共役研究では、HLGRマーカーは、関連する70 kbプラスミドの有無にかかわらず、さまざまな周波数で転写できることが示されました。詳細な分子遺伝分析により、4つの分離株が、元々は米国で分離された腸球菌菌株HH22で同定されたTN5281と同様のトランスポゾンを抱いていることが示唆されました。しかし、英国のトランスポゾンには、TN5281で見つかった2つの対称的に位置するHAEIIIサイトがありませんでした。残りの6つの分離株は、AAC6'-APH2 "遺伝子が5 '末端にIS256要素によって側面に隣接するTN5281が融合した構造を持っているように見えました。9つの制限エンドヌクレアーゼによるさらなる研究により、AAC6'-APH2"遺伝子が関連していることが示されました。E. faeciumには2つの異なるプラスミドタイプがあります。パルスフィールドゲル電気泳動（PFGE）分析により、3つの異なるパターンが特定されました。TN5281様構造を抱える4つのE. faecium分離株は互いに区別できませんでしたが、残りの6つの分離株は2つの異なるPFGEパターンを示しました。これは、英国のE. faecium分離株のHLGR表現型を付与するプラスミドの間に不均一性があることを示す最初の研究であり、AAC6'-を抱えるE. faeciumのTN5281と同様のトランスポゾンの存在を報告することを示しています。APH2 "遺伝子。

Ten clinical isolates of high-level gentamicin-resistant (HLGR) Enterococcus faecium, collected from six hospitals throughout the UK, were studied to determine whether HLGR was attributed to widespread dissemination of a single plasmid or whether different plasmid types were implicated in the dissemination of this phenotype. HLGR was attributed to the presence of the AAC6'-APH2" bifunctional aminoglycoside modifying enzyme. The aac6'-aph2" gene was present on a 70 kb plasmid in all ten isolates. Conjugation studies indicated that the HLGR marker could transfer with varying frequency, with or without the associated 70 kb plasmid. Detailed molecular genetic analysis suggested that four of the isolates harboured a transposon similar to Tn5281, originally identified in Enterococcus faecalis strain HH22 isolated in the USA. The UK transposon, however, lacked the two symmetrically located HaeIII sites found in Tn5281. The six remaining isolates appeared to have a Tn5281-truncated structure in which the aac6'-aph2" gene is flanked by an IS256 element at the 5' end. Further studies with nine restriction endonucleases showed that the aac6'-aph2" gene was associated with two different plasmid types in E. faecium. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) analysis identified three different patterns. The four E. faecium isolates harbouring the Tn5281-like structure were indistinguishable from each other, while the remaining six isolates exhibited two distinct PFGE patterns. This is the first study to indicate that there is heterogeneity among the plasmids that confer the HLGR phenotype in E. faecium isolates in the UK and to report on the presence of a transposon, similar to Tn5281, in E. faecium harbouring the aac6'-aph2" gene.