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FEBS letters1999Jun25Vol.453issue(3)

C11-Bodipyを使用した生細胞における脂質酸化の比率蛍光顕微鏡(581/591)

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

生細胞における脂質酸化のオンライン局在と定量化のために、比率蛍光アッセイが開発されました。このアッセイは、C11-Bodipy(581/591)の酸化感度を調査します。酸化すると、このフルオロフォアの蛍光は赤から緑にシフトします。このプローブは、細胞膜に容易に組み込まれており、アラキドン酸の酸化に約2倍敏感です。共焦点顕微鏡を使用して、C11-Bodipy(581/591)のクメンヒドロペルオキシド誘発酸化を、ラット-1線維芽細胞の細胞下レベルで視覚化しました。トコフェロールによる細胞のプリロードは、この酸化を遅らせました。データは、C11-Bodipy(581/591)が、単一細胞の脂質酸化と抗酸化効果を定量化するための貴重なツールであることを示しています。

生細胞における脂質酸化のオンライン局在と定量化のために、比率蛍光アッセイが開発されました。このアッセイは、C11-Bodipy(581/591)の酸化感度を調査します。酸化すると、このフルオロフォアの蛍光は赤から緑にシフトします。このプローブは、細胞膜に容易に組み込まれており、アラキドン酸の酸化に約2倍敏感です。共焦点顕微鏡を使用して、C11-Bodipy(581/591)のクメンヒドロペルオキシド誘発酸化を、ラット-1線維芽細胞の細胞下レベルで視覚化しました。トコフェロールによる細胞のプリロードは、この酸化を遅らせました。データは、C11-Bodipy(581/591)が、単一細胞の脂質酸化と抗酸化効果を定量化するための貴重なツールであることを示しています。

A ratio-fluorescence assay was developed for on-line localization and quantification of lipid oxidation in living cells. The assay explores the oxidative sensitivity of C11-BODIPY(581/591). Upon oxidation, the fluorescence of this fluorophore shifts from red to green. The probe incorporates readily into cellular membranes and is about twice as sensitive to oxidation as arachidonic acid. Using confocal microscopy, the cumene hydroperoxide-induced oxidation of C11-BODIPY(581/591) was visualized at the sub-cellular level in rat-1 fibroblasts. Preloading of the cells with tocopherol retarded this oxidation. The data demonstrate that C11-BODIPY(581/591) is a valuable tool to quantify lipid oxidation and anti-oxidant efficacy in single cells.

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