B-RAFは、MEK/ERK経路を活性化することにより、ミトコンドリアからのシトクロムC放出の下流のプログラムされた細胞死を阻害します

ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI 3-キナーゼ）やRAFキナーゼなどの成長因子依存性キナーゼは、アポトーシスの抑制に関与しています。最近、B-RAFを過剰発現するRAT-1線維芽細胞株を確立し、MEK/ERKマイトジェン活性化プロテインキナーゼ経路の活性化につながりました。B-RAFの過剰発現は、成長因子の離脱またはPI 3-キナーゼ阻害によって誘発されるアポトーシスに対する耐性を供給します。これには、PI 3-キナーゼ/Akt経路に影響を与えないERKの構成的活性化が伴います。MEKの活性は、特定のMEK阻害剤PD98059での治療または優性阻害MEK変異体の発現のいずれかがB-RAFの抗アポトーシス活性をブロックするため、B-Raf過剰発現によって媒介される細胞生存に不可欠です。MEKの活性化は必要であるだけでなく、B-RAFのような構成的に活性化されたMEK、RA、またはRAF-1の過剰発現が成長因子の剥離後のアポトーシスを防ぐため、細胞生存にも十分です。B-RAFの過剰発現は、成長因子の剥離後のミトコンドリアからのシトクロムCの放出を妨害しませんでした。しかし、B-RAFを過剰発現する細胞のサイトゾルへのシトクロムCの添加は、カスパーゼの活性化を誘導できなかった。したがって、B-RAF/MEK/ERK経路は、ミトコンドリアからのシトクロムCの放出の下流であるサイトゾルカスパーゼ活性化のレベルでのアポトーシスに対する保護を付与するように見えます。

Growth factor-dependent kinases, such as phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-kinase) and Raf kinases, have been implicated in the suppression of apoptosis. We have recently established Rat-1 fibroblast cell lines overexpressing B-Raf, leading to activation of the MEK/Erk mitogen-activated protein kinase pathway. Overexpression of B-Raf confers resistance to apoptosis induced by growth factor withdrawal or PI 3-kinase inhibition. This is accompanied by constitutive activation of Erk without effects on the PI 3-kinase/Akt pathway. The activity of MEK is essential for cell survival mediated by B-Raf overexpression, since either treatment with the specific MEK inhibitor PD98059 or expression of a dominant inhibitory MEK mutant blocks the antiapoptotic activity of B-Raf. Activation of MEK is not only necessary but also sufficient for cell survival because overexpression of constitutively activated MEK, Ras, or Raf-1, like B-Raf, prevents apoptosis after growth factor deprivation. Overexpression of B-Raf did not interfere with the release of cytochrome c from mitochondria after growth factor deprivation. However, the addition of cytochrome c to cytosols of cells overexpressing B-Raf failed to induce caspase activation. It thus appears that the B-Raf/MEK/Erk pathway confers protection against apoptosis at the level of cytosolic caspase activation, downstream of the release of cytochrome c from mitochondria.