カルモジュリンは、精製および再構成されたイノシトール1,4,5-三リン酸受容体タイプ1を介してイノシトール1,4,5-三リン酸誘導カルシウム放出を阻害します。

私たちの以前の研究では、カルモジュリンがCA2+依存的にIP3RタイプI（IP3R1）に結合することが実証されており、これはカルモジュリンがIP3R1チャネルを調節することを示唆しています。本研究では、カルモジュリンとIP3R1の間の相互作用のリアルタイム動態と、精製および再構成されたIP3R1によるIP3誘導Ca2+放出に対するカルモジュリンの影響を調査しました。速度論的分析により、カルモジュリンはCa2+依存的にIP3R1に結合し、関連期と解離段階の両方がK（A）= 4.46 x 10（2）および> 10（4）m（-1）の時間定数を持つ2つの成分で構成されていることが明らかになりました。S（-1）k（d）= 1.44 x 10（-2）および1.17 x 10（-1）s（-1）。見かけの解離定数は、27.3 microMと計算されました。精製および再構成されたIP3R1を介したIP3誘導Ca2+放出は、用量依存的にCa2+/Calmodulinによって阻害されました。私たちの発見は、カルモジュリンがIP3Rチャネル活性に抑制効果を発揮するためにCa2+依存的にIP3R1に結合することを意味すると解釈します。このイベントは、Ca2+によるIP3誘導Ca2+放出の負のフィードバック調節を管理するメカニズムの1つである可能性があります。

Our previous studies have demonstrated that calmodulin binds to IP3R type I (IP3R1) in a Ca2+ dependent manner, which suggests that calmodulin regulates the IP3R1 channel. In the present study, we investigated real-time kinetics of interactions between calmodulin and IP3R1 as well as effects of calmodulin on IP3-induced Ca2+ release by purified and reconstituted IP3R1. Kinetic analysis revealed that calmodulin binds to IP3R1 in a Ca2+ dependent manner and that both association and dissociation phase consist of two components with time constants of k(a) = 4.46 x 10(2) and > 10(4) M(-1) s(-1) k(d) = 1.44 x 10(-2) and 1.17 x 10(-1) s(-1). The apparent dissociation constant was calculated to be 27.3 microM. The IP3-induced Ca2+ release through the purified and reconstituted IP3R1 was inhibited by Ca2+/calmodulin, in a dose dependent manner. We interpret our findings to mean that calmodulin binds to IP3R1 in a Ca2+ dependent manner to exert inhibitory effect on IP3R channel activity. This event may be one of the mechanisms governing the negative feedback regulation of IP3-induced Ca2+ release by Ca2+.