単球の走化性活性の展示と付随するS19リボソームタンパク質のホモ減少における架橋残基の測定

S19リボソームタンパク質分子がトランスグルタミナーゼ触媒反応によって分子間架橋されると、単球走化性活性が新たに発現されます。ヘパリンは、1 U/mLの濃度で、架橋反応を大幅に増強しました。この増強は、S19リボソームタンパク質のヘパリンへの結合親和性によるものでした。S19リボソームタンパク質の主要なヘパリン結合領域は、領域指向の変異タンパク質を使用して、Lys23-Lys-SER-Lys-Leu-Lys29に同定されました。次に、分子架橋に使用されるS19リボソームタンパク質のアミノ酸残基を、アミノ酸配列決定によるペプチドMAP分析と部位指向の突然変異誘発によって決定しました。GLN137とLys122は、分子間架橋で使用されました。

When S19 ribosomal protein molecules are intermolecularly cross-linked by a transglutaminase-catalyzed reaction, the monocyte chemotactic activity is newly expressed. Heparin, at a concentration of 1 U/ml, greatly augmented the cross-linking reaction. This augmentation was due to binding affinity of S19 ribosomal protein to heparin. The major heparin-binding region of S19 ribosomal proteins was identified to Lys23-Lys-Ser-Gly-Lys-Leu-Lys29, using region-directed mutant proteins. The amino acid residues of S19 ribosomal protein used for the intermolecular cross-linkage were then determined by the peptide map analysis with amino acid sequencing and by the site-directed mutagenesis; Gln137 and Lys122 were used in the intermolecular cross-linkage.