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Mutagenesis1999Jan01Vol.14issue(1)

過酸化水素とコーヒーはG:C-> T:カタラーゼ欠損大腸菌のLACI遺伝子のトランスバージョンを誘導します。

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文献タイプ:
  • Comparative Study
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

過酸化水素(H2O2)の変異原性は、H2O2を生成する複雑な混合物であるコーヒーの変異性と比較されました。カタラーゼ活性(KATGケイト二重変異体)に欠陥のある大腸菌株が、酸化物質に対する変異原性反応を促進するために、ムカブ(PRW144)プラスミドを単一のコピー(PRW144)プラスミドの運ぶことを構築しました。ムカブ遺伝子がH2O2誘導変異のタイプ、頻度、および分布に影響を与える能力は、PRW144を欠く同性細菌でも調査されました。誘導された変異スペクトルを特徴付け、自然変異誘発のそれと比較しました。LACI遺伝子の最初の210 bpに影響を与える合計444の独立した前方突然変異は、DNA配列分析によって特定されました。自発的変異スペクトルは、G:C塩基対での置換についてバイアス(p = 0.52)を示さなかった(p = 0.52)。対照的に、H2O2誘導スペクトルでは、G:Cの塩基対(P <0.0001)で優先的に発生しました。これらのデータは、7,8-ジヒドロ-8-オキソグアニンがH2O2によって誘導される主な前後の病変であり、カタラーゼ欠損細菌がH2O2曝露後の染色体DNAの8-オキソグアニンのレベルが上昇しているという見解を支持しています。コーヒーは、H2O2と同様の変異イベントの分布を生成し(p> 0.05)、この化合物がコーヒー誘発性変異誘発の主な原因である可能性を示唆しています。プラスミドPRW144の存在は、H2O2誘導G:C-> T:A Transionsの頻度には影響しませんでしたが、A:T-> T:A Transionsと-1塩基フレームシフトの減少を引き起こしました。g:c-> t:aトランスバージョンの周波数は、3つの誘導スペクトル(H2O2およびCoffee +/- Prw144)で類似していましたが、標的遺伝子全体の変異の位置で違いが観察されました。

過酸化水素(H2O2)の変異原性は、H2O2を生成する複雑な混合物であるコーヒーの変異性と比較されました。カタラーゼ活性(KATGケイト二重変異体)に欠陥のある大腸菌株が、酸化物質に対する変異原性反応を促進するために、ムカブ(PRW144)プラスミドを単一のコピー(PRW144)プラスミドの運ぶことを構築しました。ムカブ遺伝子がH2O2誘導変異のタイプ、頻度、および分布に影響を与える能力は、PRW144を欠く同性細菌でも調査されました。誘導された変異スペクトルを特徴付け、自然変異誘発のそれと比較しました。LACI遺伝子の最初の210 bpに影響を与える合計444の独立した前方突然変異は、DNA配列分析によって特定されました。自発的変異スペクトルは、G:C塩基対での置換についてバイアス(p = 0.52)を示さなかった(p = 0.52)。対照的に、H2O2誘導スペクトルでは、G:Cの塩基対(P <0.0001)で優先的に発生しました。これらのデータは、7,8-ジヒドロ-8-オキソグアニンがH2O2によって誘導される主な前後の病変であり、カタラーゼ欠損細菌がH2O2曝露後の染色体DNAの8-オキソグアニンのレベルが上昇しているという見解を支持しています。コーヒーは、H2O2と同様の変異イベントの分布を生成し(p> 0.05)、この化合物がコーヒー誘発性変異誘発の主な原因である可能性を示唆しています。プラスミドPRW144の存在は、H2O2誘導G:C-> T:A Transionsの頻度には影響しませんでしたが、A:T-> T:A Transionsと-1塩基フレームシフトの減少を引き起こしました。g:c-> t:aトランスバージョンの周波数は、3つの誘導スペクトル(H2O2およびCoffee +/- Prw144)で類似していましたが、標的遺伝子全体の変異の位置で違いが観察されました。

The mutagenicity of hydrogen peroxide (H2O2) was compared with that of coffee, a complex mixture which generates H2O2. An Escherichia coli strain defective in catalase activity (katG katE double mutant) and carrying a single copy mucAB (pRW144) plasmid was constructed to enhance the mutagenic response to oxidants. The ability of the mucAB genes to influence the type, frequency and distribution of H2O2-induced mutations was also investigated in isogenic bacteria lacking pRW144. Induced mutational spectra were characterized and compared with that of spontaneous mutagenesis. A total of 444 independent forward mutations affecting the first 210 bp of the lacI gene were identified by DNA sequence analysis. The spontaneous mutation spectrum showed no bias (P = 0.52) for substitutions at G:C base pairs. In contrast, in the H2O2-induced spectrum substitutions occurred preferentially at G:C base pairs (P < 0.0001) with a preponderance of G:C-->T:A transversions (43.4% of H2O2-induced mutants versus 17.3% of spontaneous mutants). These data support the view that 7,8-dihydro-8-oxoguanine is the main premutagenic lesion induced by H2O2 and that catalase-defective bacteria have elevated levels of 8-oxoguanine in chromosome DNA after H2O2 exposure. Coffee produced a similar distribution of mutational events as H2O2 (P > 0.05), suggesting that this compound may be the main cause of the coffee-induced mutagenesis. The presence of plasmid pRW144 did not affect the frequency of H2O2-induced G:C-->T:A transversions, but caused an increase in A:T-->T:A transversions and a decrease in -1 base frameshifts. Although the frequencies of G:C-->T:A transversions were similar in all three induced spectra (H2O2 and coffee +/- pRW144), differences were observed in location of mutations throughout the target gene.

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