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Journal of structural biology1999Sep01Vol.127issue(2)

構造のツールとしての金属化合物と、リボソーム粒子の中程度解像度マップの解釈としての金属化合物

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
  • Review
概要
Abstract

リボソーム結晶の誘導体化のために、重金属塩と組み合わせた有機金属クラスターと配位化合物を利用する手順が開発されました。これらは、Haloarcula MarismortuiおよびMarismortuiからの大きなサブユニットの大規模サブユニットの最大分解能3 aに回転する結晶3 Aを得るリボソーム粒子の異常散乱中程度分解電子密度マップと組み合わせた複数の同型置換(miR)および複数の同型置換の構築を可能にしました。Thermus Thermophilusの小さなサブユニット。小さなサブユニットの7。3-a miRマップの解釈の最初のステップは、結晶化前に粒子の表面に露出したスルフヒドリルに共有結合したテトレアジウムクラスターの助けを借りて作成されました。これらのスルフヒドリルの位置は、miRフェーズで構築された差異フーリエマップに局在していました。

リボソーム結晶の誘導体化のために、重金属塩と組み合わせた有機金属クラスターと配位化合物を利用する手順が開発されました。これらは、Haloarcula MarismortuiおよびMarismortuiからの大きなサブユニットの大規模サブユニットの最大分解能3 aに回転する結晶3 Aを得るリボソーム粒子の異常散乱中程度分解電子密度マップと組み合わせた複数の同型置換(miR)および複数の同型置換の構築を可能にしました。Thermus Thermophilusの小さなサブユニット。小さなサブユニットの7。3-a miRマップの解釈の最初のステップは、結晶化前に粒子の表面に露出したスルフヒドリルに共有結合したテトレアジウムクラスターの助けを借りて作成されました。これらのスルフヒドリルの位置は、miRフェーズで構築された差異フーリエマップに局在していました。

Procedures were developed exploiting organometallic clusters and coordination compounds in combination with heavy metal salts for derivatization of ribosomal crystals. These enabled the construction of multiple isomorphous replacement (MIR) and multiple isomorphous replacement combined with anomalous scattering medium-resolution electron density maps for the ribosomal particles that yield the crystals diffracting to the highest resolution, 3 A, of the large subunit from Haloarcula marismortui and the small subunit from Thermus thermophilus. The first steps in the interpretation of the 7. 3-A MIR map of the small subunit were made with the aid of a tetrairidium cluster that was covalently attached to exposed sulfhydryls on the particle's surface prior to crystallization. The positions of these sulfhydryls were localized in difference Fourier maps that were constructed with the MIR phases.

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