HMLH1およびHPMS1のヘテロダイマーであるHmutlbetaの識別

HMLH1およびHPMS2は、Hmutlalphaと呼ばれるヘテロダイマーの形での脚の不一致修復において機能します。この因子を欠く腫瘍または細胞株は、変異体の表現型とマイクロサテライトの不安定性を示し、HMLH1およびHPMS2遺伝子の突然変異は遺伝性非ポリポーシス結腸癌の素因となっています。3番目のMutlホモログHPMS1も、1つの癌を起こしやすいKindredで変異していることが報告されていますが、この遺伝子座によってコードされたタンパク質はこれまで機能なしで残っています。ここで、HPMS1はヒト細胞で発現し、HMLH1と高い親和性で相互作用してヘテロダイマーhmutlbetaを形成することを示しています。バキュロウイルス系で発現した組換えHmutlalphaとHmutlbetaは、in vitroミスマッチ修復アッセイでの活動についてテストされました。Hmutlalphaは、HMLH1またはHPMS2を欠くミスマッチ修復欠損細胞株の抽出物を完全に補完することができましたが、Hmutlbetaはこのアッセイでテストされた異なる基質のいずれでもそうすることができませんでした。したがって、後期のミスマッチ修復における後者の要因の関与は、まだ実証されていない。

hMLH1 and hPMS2 function in postreplicative mismatch repair in the form of a heterodimer referred to as hMutLalpha. Tumors or cell lines lacking this factor display mutator phenotypes and microsatellite instability, and mutations in the hMLH1 and hPMS2 genes predispose to hereditary non-polyposis colon cancer. A third MutL homologue, hPMS1, has also been reported to be mutated in one cancer-prone kindred, but the protein encoded by this locus has so far remained without function. We now show that hPMS1 is expressed in human cells and that it interacts with hMLH1 with high affinity to form the heterodimer hMutLbeta. Recombinant hMutLalpha and hMutLbeta, expressed in the baculovirus system, were tested for their activity in an in vitro mismatch repair assay. While hMutLalpha could fully complement extracts of mismatch repair-deficient cell lines lacking hMLH1 or hPMS2, hMutLbeta failed to do so with any of the different substrates tested in this assay. The involvement of the latter factor in postreplicative mismatch repair thus remains to be demonstrated.