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Applied and environmental microbiology1999Nov01Vol.65issue(11)

ヒト結腸細菌によるアミロペクチンと高アミローストウモロコシ(アミロマイズ)デンプン顆粒のin vitro利用

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

一定量の摂取された澱粉がヒト小腸の消化から逃れることができることが十分に確立されており、その結果、大腸に入り、そこで細菌発酵の炭素源として機能する可能性があります。38種類のヒト結腸細菌は、澱粉寒天プレートの透明なゾーンを測定することにより、可溶性澱粉、ゼラチン化アミロペクチントウモロコシ澱粉、および高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を利用する能力についてスクリーニングされました。アミロペクチントウモロコシ澱粉を含むプレートに透明なゾーンを生成した6つの培養物は、アミロペクチントウモロコシ澱粉と高アミローストウモロコシ澱粉顆粒A(アミロース; Sigma)およびB(Culture Pro 958N)を利用するためのさらなる研究のために選択されました。ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)を使用して、細菌澱粉分解酵素を検出しました。Bifidobacterium spp。、Bacteroides spp。、Fusobacterium spp。、およびHeubacterium、Clostridium、Streptococcus、およびPropionibacteriumの株は、ゼラチン化アミロペクチントウモロコシ澱粉を加水分解できるが、ビフィドバクテリアSPPだけを加水分解できることが実証されました。クロストリジウムbutyricumは、高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を効率的に利用できます。実際、C。butyricumおよびbifidobacterium spp。高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を含むオートクレーブ培地では、それぞれアミロースの80%と40%を加水分解した特異的成長率が高かった。澱粉分解酵素は、ビフィドバクテリウムおよびバクテロイド細胞に細胞結合され、C。butyricumの細胞外でした。SDS-PAGEゲル上の澱粉分解酵素の活性染色により、ビフィドバクテリウム細胞は、高い相対分子(M(R))重量(> 160,000)、中型相対分子量(> 66,000)を持ついくつかのデンプン分解酵素を生成することが示されました。低分子量(<66,000)。Bifidobacterium spp。C. butyricumは、アミロマイズデンプンの顆粒を劣化させ、利用しました。

一定量の摂取された澱粉がヒト小腸の消化から逃れることができることが十分に確立されており、その結果、大腸に入り、そこで細菌発酵の炭素源として機能する可能性があります。38種類のヒト結腸細菌は、澱粉寒天プレートの透明なゾーンを測定することにより、可溶性澱粉、ゼラチン化アミロペクチントウモロコシ澱粉、および高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を利用する能力についてスクリーニングされました。アミロペクチントウモロコシ澱粉を含むプレートに透明なゾーンを生成した6つの培養物は、アミロペクチントウモロコシ澱粉と高アミローストウモロコシ澱粉顆粒A(アミロース; Sigma)およびB(Culture Pro 958N)を利用するためのさらなる研究のために選択されました。ドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)を使用して、細菌澱粉分解酵素を検出しました。Bifidobacterium spp。、Bacteroides spp。、Fusobacterium spp。、およびHeubacterium、Clostridium、Streptococcus、およびPropionibacteriumの株は、ゼラチン化アミロペクチントウモロコシ澱粉を加水分解できるが、ビフィドバクテリアSPPだけを加水分解できることが実証されました。クロストリジウムbutyricumは、高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を効率的に利用できます。実際、C。butyricumおよびbifidobacterium spp。高アミローストウモロコシ澱粉顆粒を含むオートクレーブ培地では、それぞれアミロースの80%と40%を加水分解した特異的成長率が高かった。澱粉分解酵素は、ビフィドバクテリウムおよびバクテロイド細胞に細胞結合され、C。butyricumの細胞外でした。SDS-PAGEゲル上の澱粉分解酵素の活性染色により、ビフィドバクテリウム細胞は、高い相対分子(M(R))重量(> 160,000)、中型相対分子量(> 66,000)を持ついくつかのデンプン分解酵素を生成することが示されました。低分子量(<66,000)。Bifidobacterium spp。C. butyricumは、アミロマイズデンプンの顆粒を劣化させ、利用しました。

It has been well established that a certain amount of ingested starch can escape digestion in the human small intestine and consequently enters the large intestine, where it may serve as a carbon source for bacterial fermentation. Thirty-eight types of human colonic bacteria were screened for their capacity to utilize soluble starch, gelatinized amylopectin maize starch, and high-amylose maize starch granules by measuring the clear zones on starch agar plates. The six cultures which produced clear zones on amylopectin maize starch- containing plates were selected for further studies for utilization of amylopectin maize starch and high-amylose maize starch granules A (amylose; Sigma) and B (Culture Pro 958N). Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used to detect bacterial starch-degrading enzymes. It was demonstrated that Bifidobacterium spp., Bacteroides spp., Fusobacterium spp., and strains of Eubacterium, Clostridium, Streptococcus, and Propionibacterium could hydrolyze the gelatinized amylopectin maize starch, while only Bifidobacterium spp. and Clostridium butyricum could efficiently utilize high-amylose maize starch granules. In fact, C. butyricum and Bifidobacterium spp. had higher specific growth rates in the autoclaved medium containing high-amylose maize starch granules and hydrolyzed 80 and 40% of the amylose, respectively. Starch-degrading enzymes were cell bound on Bifidobacterium and Bacteroides cells and were extracellular for C. butyricum. Active staining for starch-degrading enzymes on SDS-PAGE gels showed that the Bifidobacterium cells produced several starch-degrading enzymes with high relative molecular (M(r)) weights (>160,000), medium-sized relative molecular weights (>66,000), and low relative molecular weights (<66,000). It was concluded that Bifidobacterium spp. and C. butyricum degraded and utilized granules of amylomaize starch.

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