組織トランスグルタミナーゼは、アポトーシス切断中のカスパーゼ基質であり、トランスアミジンティング機能の喪失を引き起こし、カスパーゼ3活性化の生化学マーカーです。

組織トランスグルタミナーゼ（TTG）は、細胞内成分の漏れを防ぐタンパク質足場を不可逆的に組み立てることにより、アポトーシス機構に関与するCa2+依存性架橋酵素です。本研究では、TTGを検出する単一鎖抗体フラグメント（SCFV）が説明されています。ギニアPIG肝臓TTGに結合することにより、ヒトV遺伝子セグメントのフェーズディスプレイライブラリから選択されたTG/F8 SCFVが、ウエスタンブロットと免疫組織化学の両方でヒトTTGと反応できることを実証します。ヒト胸腺細胞におけるTG/F8によるTTGの特異的検出は、精製されたタンパク質の質量分析分析によって検証されています。さらに、リンパ細胞では、TTGがアポトーシス死の後期にカスパーゼ3によって切断され、DNA断片化に付随すること、およびそのような切断が架橋機能の喪失を引き起こすことを示しています。アポトーシスの後期実行段階で、カスパーゼ3活性化の貴重な生化学マーカーとしてTTG切断を提案します。

Tissue transglutaminase (tTG) is a Ca2+-dependent cross-linking enzyme that participates in the apoptotic machinery by irreversibly assembling a protein scaffold that prevents the leakage of intracellular components. In the present study a single-chain antibody fragment (scFv) detecting tTG is described. We demonstrate that TG/F8 scFv, selected from a phase display library of human V-gene segments by binding to guinea-pig liver tTG, can react with human tTG both in Western blot and in immunohistochemistry. The specific detection of tTG by TG/F8 in human thymocytes is verified by mass spectrometric analysis of the purified protein. Furthermore, we demonstrate that in lymphoid cells tTG is cleaved by caspase 3 during the late phase of apoptotic death, concomitant to DNA fragmentation, and that such cleavage causes loss of cross-linking function. We propose tTG cleavage as a valuable biochemical marker of caspase 3 activation during the late execution phase of apoptosis.