TOL様プラスミドの夫婦移動とPseudomonas putida F1の異化能の伸長

唯一の炭素源として0.5％（v/v）メタキシレンを伴う最小培地で濃縮した後、株MX株はガソリン汚染土壌から分離されました。株は暫定的にPseudomonas putidaとして特徴付けられ、アルキルモノオキシゲナーゼとカテコール2,3-ジオキシゲナーゼを介して、トルエンまたはメタキシレン分解経路に関与するキシル遺伝子を含む大きなプラスミド（PMX）を抱いていました。この新しいTOLのようなプラスミドは、200世代を超えて安定しており、自己移行可能でした。TOD染色体トルエン生分解経路を持つP. putida F1への夫婦移植の後、トランスジュジュガンP. putida F1（PMX）は、ベンゼン、トルエン、メタキシレン、パラシレン、およびエチルベンゼン化合物で成長することができました。炭素源。トランスコンジュガン細胞のカテコール2,3-ジオキシゲナーゼは、親細胞のものよりも緩和された基質特異性を示しました（株MXおよびP. putida F1）。

Strain mX was isolated from a petrol-contaminated soil, after enrichment on minimal medium with 0.5% (v/v) meta-xylene as a sole carbon source. The strain was tentatively characterized as Pseudomonas putida and harboured a large plasmid (pMX) containing xyl genes involved in toluene or meta-xylene degradation pathways via an alkyl monooxygenase and a catechol 2,3-dioxygenase. This new TOL-like plasmid was stable over two hundred generations and was self-transferable. After conjugal transfer to P. putida F1, which possesses the Tod chromosomal toluene biodegradative pathway, the transconjugant P. putida F1(pMX) was able to grow on benzene, toluene, meta-xylene, para-xylene, and ethylbenzene compounds as the sole carbon sources. Catechol 2,3-dioxygenases of the transconjugant cells presented a more relaxed substrate specificity than those of parental cells (strain mX and P. putida F1).