アデノシンA1およびA2A受容体の活性化は、安定してトランスフェクトされたヒト神経芽細胞腫細胞におけるドーパミンD2受容体誘発反応を調節します

アデノシンは、アデノシンA2AとドーパミンD2受容体の間のシナプス後相互作用を介して、大脳基底核のドーパミン作動性神経伝達に影響を与える可能性があります。細胞レベルでのA2A/D2受容体の相互作用を調査するために、構成的に中程度のレベルのアデノシンA1およびA2A受容体（約100 FMOL/mgのタンパク質）を発現することがわかったヒト神経芽細胞腫細胞株（SH-SY5Y）を使用しました。。ヒトD2L受容体cDNAのトランスフェクション後、SH-SY5Y細胞は500〜1,100 FMOLのD2受容体/mgのタンパク質を発現しました。膜製剤では、アデノシンA2A受容体の刺激により、ドーパミンのドーパミンD2受容体の親和性が低下しました。無傷の細胞では、KCI処理によって誘導されるカルシウム濃度の上昇は中程度であり、ドーパミンは、静止した細胞内遊離Ca2+濃度（[Ca2+] I）またはKCI誘導反応のいずれにも影響を与えませんでした。対照的に、アデノシンデアミナーゼと2日間前処理して、KCIによって引き起こされた[Ca2+] Iの上昇が劇的に増加し、ドーパミンによって完全に逆転しました。48時間のアデノシンの不活性化によって誘発される効果は、アデノシンA1拮抗薬の適用によって模倣され、A1またはA2A受容体のいずれかの急性活性化によってさらに逆転することはできませんでした。選択的A2受容体アゴニストCGS-21680の急性散布により、D2受容体誘導[Ca2+] I応答に対抗しました。本研究は、SH-SY5Y細胞に機能性アデノシンA2AおよびA1受容体に寄付され、A2A受容体がドーパミンD2受容体媒介機能に拮抗的な急性効果を発揮することを示しています。対照的に、A1受容体は、これらのドーパミン機能に強壮剤調節の役割を誘導します。

Adenosine can influence dopaminergic neurotransmission in the basal ganglia via postsynaptic interaction between adenosine A2A and dopamine D2 receptors. We have used a human neuroblastoma cell line (SH-SY5Y) that was found to express constitutively moderate levels of adenosine A1 and A2A receptors (approximately 100 fmol/mg of protein) to investigate the interactions of A2A/D2 receptors, at a cellular level. After transfection with human D2L receptor cDNA, SH-SY5Y cells expressed between 500 and 1,100 fmol of D2 receptors/mg of protein. In membrane preparations, stimulation of adenosine A2A receptors decreased the affinity of dopamine D2 receptors for dopamine. In intact cells, the calcium concentration elevation induced by KCI treatment was moderate, and dopamine had no effect on either resting intracellular free Ca2+ concentration ([Ca2+]i) or KCI-induced responses. In contrast, pretreatment with adenosine deaminase for 2 days dramatically increased the elevation of [Ca2+]i evoked by KCI, which then was totally reversed by dopamine. The effects induced by 48-h adenosine inactivation were mimicked by application of adenosine A1 antagonists and could not be further reversed by acute activation of either A1 or A2A receptors. Acute application of the selective A2 receptor agonist CGS-21680 counteracted the D2 receptor-induced [Ca2+]i responses. The present study shows that SH-SY5Y cells are endowed with functional adenosine A2A and A1 receptors and that A2A receptors exert an antagonistic acute effect on dopamine D2 receptor-mediated functions. In contrast, A1 receptors induce a tonic modulatory role on these dopamine functions.