ニューロン前駆細胞アポトーシスのカスパーゼ調節

増殖した神経芽細胞とメタン後のニューロンの両方のプログラムされた細胞死（アポトーシス）は、正常な神経系の発達に不可欠です。神経前駆細胞細胞におけるアポトーシスの分子調節を研究するために、生存、アポトーシス、および壊死細胞集団を区別できるフローサイトメトリックアッセイを開発しました。シトシンアラビノシド（ARAC）またはスタウロスポリンのいずれかを伴う妊娠日12〜13のマウス胚からの新たに解離した終末細胞のインキュベーションは、アポトーシス細胞の割合の著しい増加を引き起こしました。両方の薬物は、カスパーゼ-3基質のin vitro切断と活性化カスパーゼ-3の免疫細胞化学的検出によって決定されるように、カスパーゼ-3活性化を誘導しました。広いカスパーゼ阻害剤BAFによる終末細胞の治療は、アラックとスタウロスポリン誘発アポトーシス死の両方に対するカスパーゼ-3活性化をブロックし、細胞を保護しました。これらの結果は、ニューロンの前駆細胞がカスパーゼ依存性のアポトーシス経路を持っていることを示しており、その活性化はin vivoで神経前駆細胞数を調節する可能性があります。

Programmed cell death (apoptosis) of both proliferating neuroblasts and postmitotic neurons is essential for normal nervous system development. To study the molecular regulation of apoptosis in neuronal progenitor cells, we developed a flow cytometric assay capable of distinguishing between viable, apoptotic, and necrotic cell populations. Incubation of freshly dissociated telencephalic cells from gestational day 12-13 mouse embryos with either cytosine arabinoside (AraC) or staurosporine caused a marked increase in the percentage of apoptotic cells. Both drugs induced caspase-3 activation, as determined by in vitro cleavage of a caspase-3 substrate and immunocytochemical detection of activated caspase-3. Treatment of telencephalic cells with the broad caspase inhibitor BAF, blocked caspase-3 activation and protected cells against both AraC and staurosporine-induced apoptotic death. These results indicate that neuronal progenitors possess a caspase-dependent apoptotic pathway, the activation of which may regulate neuronal progenitor cell numbers in vivo.