GM2ガングリオシドーシスマウスにおける酵素を含む細胞の分布：骨髄移植後の細胞浸潤の地域特異的パターン

ベータヘキソサミニダーゼの組織分布は、野生型マウスの基質として5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリルn-アセチルn-アセチルベータ-D-グルコサミニド（X-HEX）を使用して調査されました。- 、hexb - / - 、gm2a - / - およびhexa - / - hexb - / - ）および骨髄移植（BMT）を受けたhexb - / - マウス。野生型マウスでは、ベータヘキソサミニダーゼの組織化学的局在化が、大部分のニューロン、小さなプロセスを含むミク​​ログリア細胞、血管周囲のマクロファージ、および脈絡叢およびレプトメニングのマクロファージのペリカリヤで検出されました。X-hex陽性は、肝臓および脾臓の腎尿細管上皮とマクロファージでも認められました。GM2A - / - およびヘキサ - / - マウスの染色パターンは、一般に野生型の染色パターンと類似していたが、これらのマウスでは、X-hex染色も腫れたペリカリヤを伴う一部の貯蔵ニューロンでも認められた。Hexb - / - またはhexa - / - hexb - / - （dko）マウスでx-hex陽性細胞は検出されませんでした。野生型BMT（HEXB - / - +WBMT）を投与されたHEXB - / - マウスでは、脾臓と腎臓で多くのX-HEX陽性細胞が検出されました。これらのマウスのCNSでは、X-hex陽性細胞が軟骨膜胎児と脈絡叢で大部分が検出されました。いくつかの陽性細胞も検出されましたが、主に大脳の血管周囲領域、特に後視床、脳幹、脊髄の領域で。X-Hex陽性細胞の一部は、MAC-1およびF4/80抗体を免疫反応させたため、ミクログリア/マクロファージ系統の細胞でした。BMT後の臨床改善にもかかわらず、これらのマウスのニューロンではX-HEX陽性染色は検出されませんでした。私たちが知る限り、これは初めて、CNSにおけるドナー細胞の領域分布が神経貯蔵疾患のモデルで調査されたことです。我々の研究は、ミクログリア/マクロファージ系統のドナー由来細胞が、BMTに続いて地域的に特定の方法でCNSに浸透したことを示した。

Tissue distribution of beta-hexosaminidase was investigated using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl N-acetyl beta-D-glucosaminide (X-Hex) as substrate in wild-type mice, four GM2 gangliosidosis model mice (Hexa-/-, Hexb-/-, Gm2a-/- and Hexa-/-Hexb-/-) and Hexb-/- mice that received bone marrow transplantation (BMT). In wild-type mice histochemical localization of beta-hexosaminidase was detected in the perikarya of the majority of neurons, small process-bearing microglial cells, perivascular macrophages, and macrophages in the choroid plexus and leptomeninges. X-Hex positivity was also noted in the renal tubular epithelium and macrophages in the liver and spleen. The staining pattern in the Gm2a-/- and Hexa-/- mice was generally similar to those of wild type, but in these mice, X-Hex stain was also noted in some storage neurons with swollen perikarya. No X-Hex-positive cells were detected in Hexb-/- or Hexa-/-Hexb-/- (DKO) mice. In Hexb-/- mice that received wild-type BMT (Hexb-/- +WBMT), many X-Hex-positive cells were detected in the spleen, and to a far lesser extent, in liver and kidney. In the CNS of these mice, X-Hex-positive cells were largely detected in the leptomeninges and choroid plexus. Some positive cells were also detected, mostly in the perivascular regions of the cerebrum, in particular in the regions of the posterior thalamus, brain stem and spinal cord. Some of X-Hex-positive cells were immunoreactive with Mac-1 and F4/80 antibodies and, thus, were cells of microglia/macrophage lineage. X-Hex-positive staining was not detected in neurons in these mice despite clinical improvement following BMT. This is the first time, as far as we know, that the regional distribution of the donor cells in the CNS has been investigated in a model of neuronal storage disease. Our study indicated that donor-derived cells of microglia/macrophage lineage infiltrated the CNS in a regionally specific manner following the BMT.