アポトーシス中のシトクロムCの座標放出は迅速で完全で、速度論的に不変です

ミトコンドリアからのシトクロムCの放出は、カスパーゼプロテアーゼの活性化とアポトーシスによる細胞の死を引き起こします。ただし、シトクロムC放出のメカニズムと速度論は不明のままです。ここでは、緑色蛍光タンパク質（GFP）タグ付きシトクロムCを使用してこのイベントを研究し、シトクロム-C-GFPの放出は常にホスファチジルセリンの曝露と血漿膜の完全性の喪失 - アポトーシス細胞の特性の喪失に先行することがわかります。一度開始されると、刺激の種類または強度、または刺激が適用されてから経過する時間に関係なく、約5分以内に、すべてのタンパク質が個々の細胞のすべてのミトコンドリアから放出されるまで、シトクロムC-GFPの放出が継続します。cから37度Cの範囲の温度は、放出期間を変化させず、カスパーゼ阻害剤の添加も変化しません。さらに、電子輸送鎖は、シトクロムCが放出された後でも、ミトコンドリア膜貫通電位を維持できることがわかります。

Release of cytochrome c from mitochondria triggers activation of caspase proteases and death of a cell by apoptosis. However, the mechanism and kinetics of cytochrome c release remain unknown. Here we study this event by using green fluorescent protein (GFP)-tagged cytochrome c, and find that the release of cytochrome-c-GFP always precedes exposure of phosphatidylserine and the loss of plasma-membrane integrity - characteristics of apoptotic cells. Once initiated, the release of cytochrome- c-GFP continues until all of the protein is released from all mitochondria in individual cells, within about 5 minutes, regardless of the type or strength of stimulus or the time elapsed since the stimulus was applied. Temperatures ranging from 24 degrees C to 37 degrees C do not change the duration of release, and nor does the addition of caspase inhibitors. Further, we find that the electron-transport chain can maintain the mitochondrial transmembrane potential even after cytochrome c has been released.