Bacillus subtilis Yabg遺伝子は、胞子形成中にSIGK RNAポリメラーゼによって転写され、YABG変異体の胞子はコートタンパク質組成を変化させました

ABRBから亜ティリス染色体のSPOVCまでの領域に位置する6つの新規遺伝子の発現を分析し、遺伝子の1つであるYABGは、SIGK依存性遺伝子の間に保存された予測プロモーター配列を有していました。ノーザンブロット分析により、YABG mRNAは、野生型細胞およびgere36（gere（ - ））変異体での対数成長（t（4））の停止後4時間から最初に検出されたことが明らかになりましたが、sigf（ - ）ではそうではありません。）、spoiigab（sige（ - ））、spoiiig（sigg（ - ））、およびspoivcb（sigk（ - ））変異体。転写開始点は、プライマー拡張分析によって決定されました。-10および-35領域は、SIGK含有RNAポリメラーゼによって認識されるコンセンサス配列と非常によく似ています。エリスロマイシン耐性遺伝子の挿入によるYABG遺伝子の不活性化は、熱、クロロホルム、およびリゾチームに対する栄養成長または胞子耐性に影響しませんでした。L-アラニンおよびL-アスパラギン、D-グルコース、D-フルクトース、および塩化カリウムの混合物中のYABG胞子の発芽も、野生型胞子の胞子と同じでした。一方、YABG胞子からのタンパク質製剤には、同じ下の野生型胞子から抽出されたか、抽出されていない55 kDaポリペプチド15、18、21-、23-、31-、45、および55 kDaポリペプチドが含まれていました。条件。それらのN末端アミノ酸配列を決定し、これらのポリペプチドがそれぞれコット、YXEE、COTF、YRBA（31および45 kDa）、およびSpoivaであることがわかりました。胞子形成細胞で生成されたYABGグリーン蛍光タンパク質融合の蛍光は、葉胞子では検出可能でしたが、蛍光顕微鏡下の母なる細胞コンパートメントでは検出できませんでした。これらの結果は、YABGがB. subtilisのコートタンパク質組成に関与する胞子形成特異的タンパク質をコードすることを示しています。

The expression of six novel genes located in the region from abrB to spoVC of the Bacillus subtilis chromosome was analyzed, and one of the genes, yabG, had a predicted promoter sequence conserved among SigK-dependent genes. Northern blot analysis revealed that yabG mRNA was first detected from 4 h after the cessation of logarithmic growth (T(4)) in wild-type cells and in a gerE36 (GerE(-)) mutant but not in spoIIAC (SigF(-)), spoIIGAB (SigE(-)), spoIIIG (SigG(-)), and spoIVCB (SigK(-)) mutants. The transcription start point was determined by primer extension analysis; the -10 and -35 regions are very similar to the consensus sequences recognized by SigK-containing RNA polymerase. Inactivation of the yabG gene by insertion of an erythromycin resistance gene did not affect vegetative growth or spore resistance to heat, chloroform, and lysozyme. The germination of yabG spores in L-alanine and in a mixture of L-asparagine, D-glucose, D-fructose, and potassium chloride was also the same as that of wild-type spores. On the other hand, the protein preparation from yabG spores included 15-, 18-, 21-, 23-, 31-, 45-, and 55-kDa polypeptides which were low in or not extracted from wild-type spores under the same conditions. We determined their N-terminal amino acid sequence and found that these polypeptides were CotT, YeeK, YxeE, CotF, YrbA (31 and 45 kDa), and SpoIVA, respectively. The fluorescence of YabG-green fluorescent protein fusion produced in sporulating cells was detectable in the forespores but not in the mother cell compartment under fluorescence microscopy. These results indicate that yabG encodes a sporulation-specific protein which is involved in coat protein composition in B. subtilis.