DNA依存性プロテインキナーゼ（DNA-PK）複合体の活性は、窒素マスタードに対する細胞応答の決定因子です

DNA依存性プロテインキナーゼは、哺乳類のDNA二重鎖切断（DSB）修復と、リンパV（D）J組換えなどの特殊な組換えに重要な役割を果たします。その調節サブユニットKu（Ku70およびKu80タンパク質の二量体）はDNAに結合し、キナーゼ触媒サブユニット、DNA-PKCを動員します。ここでは、DNA-PKのKu80（XRS-6）またはDNA-PKCS（V-3、SCID）成分のいずれかに不足している3つの異なる株がDNA Crossのグループに著しく敏感（3.5〜5倍）であることを示しています。-linking Agent、窒素マスタード（NMS）（メルファランとメクロロタミン）の親細胞株と比較して。重要なことに、これらの薬物に対する過敏症のレベルは、DNA（ブレオマイシンとネオカルジノスタチン）にDSBを生成する放射模倣薬について観察される過敏症のレベルに近いことです。さらに、NMSに対する感度は、ヒトKu80遺伝子（XRS-6/Ku80）を安定にトランスフェクトしたXRS-6細胞株の親レベルに回復し、DNA-PKがこの表現型に関与していることを明確に示しています。これらの結果は、DNA-PKタンパク質複合体全体の関数がNMSに対する細胞応答に関与していることを示しており、NMSによってDNAで誘導されたDNA間ストランドクロスリンクの修復が、共通の特徴を共有するDNA-PK依存性経路を含むことを示唆しています。DNA DSBの修復。

The DNA-dependent protein kinase plays a critical role in mammalian DNA double strand break (DSB) repair and in specialized recombination, such as lymphoid V(D)J recombination. Its regulatory subunit Ku (dimer of the Ku70 and Ku80 protein) binds to DNA and recruits the kinase catalytic sub-unit, DNA-PKcs. We show here that three different strains deficient in either the Ku80 (xrs-6) or DNA-PKcs (V-3, scid) component of DNA-PK are markedly sensitive (3.5- to 5-fold) to a group of DNA cross-linking agents, the nitrogen mustards (NMs) (melphalan and mechlorethamine) as compared to their parental cell line. Importantly, the level of hypersensitivity to these drugs was close to the level of hypersensitivity observed for radiomimetic agents that create DSBs in DNA (bleomycin and neocarzinostatin). In addition, sensitivity to NMs was restored to the parental level in the xrs-6 cell line stably transfected with the human Ku80 gene (xrs-6/Ku80), showing unequivocally that DNA-PK is involved in this phenotype. These results indicate that a function of the whole DNA-PK protein complex is involved in the cellular response to NMs and suggest that the repair of DNA interstrand cross-links induced in DNA by NMs involved a DNA-PK dependent pathway that shares common features with DNA DSBs repair.