トリアシルグリセロール合成における3T3-L1脂肪細胞の役割の分化中のペルオキシソームグリセロ脂質合成酵素の誘導

トリグリセリド合成のためのグリセロリン酸骨格は、一般に、グリセロリン酸デヒドロゲナーゼ（GPD）によるジヒドロキシアセトン（DHAP）の変換を通じて、グリセリホスリンフェース（GP）にグリセリホリホリンフェランゼーゼ（GPAT）に変換された（GP）に変換されると考えられています。- アシル-GP。これと一致して、GPDとGPATは、マウス3T3-L1前脂肪細胞の分化中に高度に誘導されます。グリセロ脂質合成のためのアシルジヒドロキシアセトン（アシルダップ）経路は、一般にグリセロールエーテル脂質合成にのみ関与していると考えられていますが、ここでは、脂肪細胞への3T3-L1前脂肪細胞の変換中に、ペルオキシソマールDHAPアシルトランスフェート（デハパット）の特異的活性であると報告しています。）6日間で9倍増加し、一方、アシルダップ：NADPHレダクターゼは5倍に誘導されます。カタラーゼ（ペルオキシソームマーカー酵素）活性の平行増加も見られます。対照的に、エーテル結合の合成を触媒する酵素であるアルキルダップシンターゼの特異的活性は、同じ期間に60％減少します。ミクロソームGPATとは異なり、誘導されたダパートはpH 5.5で高い活性を有することがわかり、スルフヒドリル剤、熱、およびタンパク質分解による阻害に耐性があります。細胞内分画では、DHAPATはマイクロペルオキシソームに関連していることがわかりましたが、GPAT活性は主にミクロソームに存在します。ノーザンブロット分析により、ダパットの誘導は、ダパットmRNAの増加を通じて主に説明できることが明らかになりました。脂質グリセロール骨格の前駆体としてのd- [3-（3）h、u-（14）c]グルコースを使用して、トリグリセリドの約40〜50％が合成されていることを示しているため、d- [3-（3）h、u-（14）c]グルコースを使用して、ミクロソームおよびペルオキシソームグリセロ脂質合成経路の比較は、アシルダップ経路。これらの結果は、アシルダップ経路がエーテル脂質の合成だけでなく、トリアシルグリセロールおよび他の非エーテルグリセロ脂質の合成にとっても重要であることを示しています。

The glycerophosphate backbone for triglyceride synthesis is commonly believed to be created through the conversion of dihydroxyacetone phosphate (DHAP) by glycerophosphate dehydrogenase (GPD) to sn-glycerol 3-phosphate (GP), which is then converted by glycerophosphate acyltransferase (GPAT) to 1-acyl-GP. Consistent with this, GPD and GPAT are highly induced during differentiation of mouse 3T3-L1 preadipocytes. While the acyl dihydroxyacetone phosphate (acyl-DHAP) pathway for glycerolipid synthesis is commonly believed to be involved only in glycerol ether lipid synthesis, we report here that during conversion of 3T3-L1 preadipocytes to adipocytes, the specific activity of peroxisomal DHAP acyltransferase (DHAPAT) is increased by 9-fold in 6 days, while acyl-DHAP:NADPH reductase is induced by 5-fold. A parallel increase in the catalase (the peroxisomal marker enzyme) activity is also seen. In contrast, the specific activity of alkyl-DHAP synthase, the enzyme catalyzing the synthesis of the ether bond, is decreased by 60% during the same period. Unlike microsomal GPAT, the induced DHAPAT is found to have high activity at pH 5.5 and is resistant to inhibition by sulfhydryl agents, heat, and proteolysis. On subcellular fractionation, DHAPAT is found to be associated with microperoxisomes whereas GPAT activity is mainly present in microsomes. Northern blot analyses reveal that induction of DHAPAT can be largely explained through increases in DHAPAT mRNA. A comparison of microsomal and peroxisomal glycerolipid synthetic pathways, using D-[3-(3)H, U-(14)C]glucose as the precursor of the lipid glycerol backbone shows that about 40-50% of triglyceride is synthesized via the acyl-DHAP pathway. These results indicate that the acyl-DHAP pathway is important not only for the synthesis of ether lipids, but also for the synthesis of triacylglycerol and other non-ether glycerolipids.