LFSおよびLFLファミリーにおける生殖細胞系P53ステータスの迅速な機能アッセイの値

P53機能の2つの迅速なアッセイ、すなわちアポトーシスアッセイとFasayは、Li-FraumeniおよびLi-Fraumeni様ファミリーのメンバーの生殖系p53変異を検出する手段としてテストしました。機能的アッセイの結果は、p53遺伝子の11エクソンすべての直接シーケンスと比較されています。結果は、2つの機能アッセイとそれらとシーケンスの間の良好な一致を示しています。アポトーシスアッセイは突然変異のない個人に1つの境界線の結果をもたらしましたが、どちらの機能アッセイでも偽陽性またはネガは見られませんでした。最初の画面として、アポトーシスアッセイは迅速であるだけでなく、安価で非常に簡単な実行が非常に簡単です。p53機能の損失につながる生殖系の欠陥を検出することが期待されます。アポトーシスアッセイは、多数のサンプルを事前スクリーニングし、さらなる調査が必要なサンプルを特定する手段として理想的です。Fasayは、エクソン4〜10の突然変異を検出し、迅速であり、機能的に重要な変異とサイレント変異を区別します。

We have tested two rapid assays of p53 function, namely the apoptotic assay and the FASAY as means of detecting germline p53 mutations in members of Li-Fraumeni and Li-Fraumeni-like families. Results of the functional assays have been compared with direct sequencing of all 11 exons of the p53 gene. The results show good agreement between the two functional assays and between them and sequencing. No false-positives or negatives were seen with either functional assay although the apoptotic assay gave one borderline result for an individual without a mutation. As an initial screen the apoptotic assay is not only rapid but inexpensive and very simple to perform. It would be expected to detect any germline defect that leads to loss of p53 function. The apoptotic assay could be ideal as a means of prescreening large numbers of samples and identifying those that require further investigation. The FASAY detects mutations in exons 4-10, is rapid and distinguishes between functionally important and silent mutations.