UM（2552）23SリボソームRNAメチルトランスフェラーゼRRMJ/FTSJに不足している大腸菌変異体の翻訳欠陥

最近、RRMJ-HFLB熱ショックオペロンの最初のコード化されたタンパク質であるRRMJ（Alias FTSJ）を、23S RRNAのUM（2552）メチルトランスフェラーゼとして特定しました。現在、RRMJ欠損ひずみは、野生型株と比較して成長と翻訳の欠陥を示すと報告しています。RRMJ変異体の成長率は、低温と高温の両方で低下します。S（30）RRMJ変異体抽出物が結合されたin vitro転写/翻訳アッセイでテストされると、タンパク質合成活性は65％まで減少します。RRMJによるこれらの抽出物のin vitroメチル化は、タンパク質合成活性を部分的に回復します。RRMJ株のポリソームプロファイル分析により、30度と42度の両方で30Sおよび50Sの遊離サブユニットの割合が増加することが明らかになります。これらの結果は、23S RNAのRRMJ触媒メチル化がリボソームサブユニット相互作用を強化し、増加し、増加することを示唆しています。タンパク質合成活性、非加熱衝撃温度でも細胞の成長速度を改善します。

We recently identified RrmJ (alias FtsJ), the first encoded protein of the rrmJ-hflB heat shock operon, as an Um(2552) methyltransferase of the 23S rRNA. We now report that the rrmJ-deficient strain exhibits growth and translational defects compared to the wild-type strain. Growth rates of the rrmJ mutant are decreased at both low and high temperatures. Protein synthesis activity is reduced up to 65% when S(30) rrmJ mutant extracts are tested in a coupled in vitro transcription/translation assay. In vitro methylation of these extracts by RrmJ partially restores protein synthesis activity. Polysome profile analysis of the rrmJ strain reveals an increase in the proportion of free 30S and 50S subunits at both 30 and 42 degrees C. These results suggest that the RrmJ-catalyzed methylation of Um(2552) in 23S RNA strengthens ribosomal subunit interactions, increases protein synthesis activity, and improves cell growth rates even at non-heat shock temperatures.