Bacillus subtilis Spore Cotの特性

分離された亜ティリス胞子コートのタンパク質の約70％は、アルカリ性pHでの減少剤と変性剤の組み合わせで処理することにより可溶化しました。主にタンパク質で構成される残基は、さまざまな試薬に不溶性でした。可溶性タンパク質は、ドデシル硫酸ナトリウムゲル電気泳動により、少なくとも7つの帯域に分解されました。合計の約半分は、8,000〜12,000のダルトンの4つのタンパク質でした。これらは比較的チロシンが豊富で、1つは糖タンパク質でした。また、20,000〜25,000ダルトンの範囲には、約40,000のダルトンと2つまたは3つのタンパク質のクラスターがありました。不溶性画分は、可溶性コートタンパク質のアミノ酸と非常によく似たアミノ酸のアミノ酸組成とN末端パターンを持っていました。大きな違いは、不溶性コートの性能酸酸化材料にかなりのジティロシンが存在することでした。成熟胞子の抽出物に存在しない60,000ダルトンタンパク質を含むコート抗原は、免疫沈降により胞子形成細胞の抽出物で検出されました。この大きな抗原は、パルスチェイスの実験で引き渡されました。8,000〜12,000-ダルトンのコートポリペプチドまたはより大きなコートタンパク質のいずれかの抗体は、この60,000ダルトン種と反応し、成熟したコートポリペプチドの多くの共通の前駆体を示唆しています。胞子コートは、タンパク質の処理と、おそらく架橋のためのジティロシン形成を含む二次修飾によって組み立てられているようです。

About 70% of the protein in isolated Bacillus subtilis spore coats was solubilized by treatment with a combination of reducing and denaturing agents at alkaline pH. The residue, consisting primarily of protein, was insoluble in a variety of reagents. The soluble proteins were resolved into at least seven bands by sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis. About one-half of the total was four proteins of 8,000 to 12,000 daltons. These were relatively tyrosine rich, and one was a glycoprotein. There was also a cluster of proteins of about 40,000 daltons and two or three in the 20,000- to 25,000-dalton range. The insoluble fraction had an amino acid composition and N-terminal pattern of amino acids very similar to those of the soluble coat proteins. A major difference was the presence of considerable dityrosine in performic acid-oxidized preparations of insoluble coats. Coat antigen including a 60,000-dalton protein not present in extracts of mature spores was detected in extracts of sporulating cells by immunoprecipitation. This large antigen turned over in a pulse-chase experiment. Antibodies to either the array of 8,000- to 12,000-dalton coat polypeptides or to the larger coat proteins reacted with this 60,000-dalton species, suggesting a common precursor for many of the mature coat polypeptides. Spore coats seem to be assembled by processing of proteins and by secondary modifications including perhaps dityrosine formation for cross-linking.