マウス血清アミロイドP成分（SAP）およびC反応性タンパク質（CRP）遺伝子のサイトカイン依存性発現におけるSTAT3およびC/EBPの役割

炎症は、サイトカインに応答して肝細胞によって合成される急性期タンパク質の血中濃度の急速な増加を伴います。C反応性タンパク質（CRP）レベルはほとんどの哺乳類で劇的に増加しますが、マウスの主要な急性期タンパク質は相同ペントラキシン、血清アミロイドP成分（SAP）ですが、CRPは軽度の急性期反応物です。マウスにおけるSAPおよびCRP遺伝子発現の顕著な違いの分子基盤は不明です。マウスCRP遺伝子の5'フランク領域を含むCATレポーターコンストラクトを使用した++/Liマウス肝腫細胞のトランスフェクションは、転写がIL-6またはIL-6プラスIL-1によって刺激されることを示しました。5'promal DNAの360 bpが存在しました。マウスSAP遺伝子の5'フランク領域の検査により、転写開始部位から-433と-397の間の領域が、STAT3とC/EBPBETAの両方を結合することによりIL-1とIL-6に応答したことが明らかになりました。この応答性領域は、2つのSTAT3コンセンサスサイトと重複する2つの隣接するC/EBPBETAコンセンサスサイトで構成され、-427から-409およびSTAT3の上流部位で-415〜 -397の上流部位でC/EBPBETAを結合することがわかった。対照的に、CRP遺伝子の360 bpプロモーターは、最初のサイトから-93、-142、-173、および-287のコンセンサスサイトでSTAT3によってのみ結合されました。ただし、-75のC/EBPの単一のコンセンサスサイトは認識されていません。STAT3は、STAT3の非アクティブな欠失変異体の過剰発現が両方の遺伝子の転写を阻害するため、マウスSAPとCRP遺伝子転写の両方に必要であると思われます。結果は、STAT3とC/EBPBETAの両方がマウスSAP遺伝子発現に関与しているのに対し、STAT3のみがマウスCRP遺伝子発現に関与していることを示しています。マウスSAP遺伝子発現の所見は、ヒトCRP遺伝子転写のこれら2つの転写因子間の報告された相互作用と一致しています。

Inflammation is accompanied by a rapid increase in blood levels of acute phase proteins synthesized by hepatocytes in response to cytokines. Although C-reactive protein (CRP) levels increase dramatically in most mammals, the major acute phase protein in the mouse is the homologous pentraxin, serum amyloid P-component (SAP), whereas CRP is a minor acute phase reactant. The molecular basis for the pronounced difference in SAP and CRP gene expression in the mouse is unknown. Transfection of ++/Li mouse hepatoma cells with CAT-reporter constructs containing the 5'-flanking region of the mouse CRP gene indicated that transcription was stimulated by either IL-6, or IL-6 plus IL-1, when > or =360 bp of the 5'-proximal DNA was present. Examination of the 5'-flanking region of the mouse SAP gene revealed that the region between -433 and -397 from the transcription start site responded to IL-1 and IL-6 by binding both STAT3 and C/EBPbeta. This responsive region consisted of two adjacent C/EBPbeta consensus sites that overlap with two STAT3 consensus sites and was found to bind C/EBPbeta at an upstream site of -427 to -409 and STAT3 at a downstream site of -415 to -397. By contrast, the 360 bp promoter of the CRP gene was bound only by STAT3 at consensus sites at -93, -142, -173, and -287 from the start site; however, a single consensus site for C/EBP at -75 was not recognized. STAT3 appears to be necessary for both mouse SAP and CRP gene transcription since overexpression of an inactive, deletion mutant of STAT3 inhibited transcription of both genes. The results indicate that both STAT3 and C/EBPbeta participate in mouse SAP gene expression, whereas only STAT3 is involved in mouse CRP gene expression. The findings for mouse SAP gene expression are consistent with the reported interaction between these two transcription factors for human CRP gene transcription.