9-cis-レチノイド：9-cis-レチノ酸の生合成

レチノイドは、リガンド依存性の核転写因子、レチノイン酸受容体、レチノイドX受容体の立体構造変化を通じて機能します。9-シス - レチノイン酸は、レチノイドX受容体の生物学的リガンドですが、in vivoでの合成経路はほとんど不明です。最近、9-cis-レチノールを9-cis-Retinalに酸化するシス - レチノールデヒドロゲナーゼ（CRDH）を特定しました。CRDH mRNAの発現とその基質の両方が肝臓で見られるため、2つの肝由来細胞タイプ、HEP G2肝腫細胞とHSC-T6ステレート細胞で9-cis-レチノール代謝と9-cis-レチノ酸生合成を研究しました。両方の細胞株は、培地で提供される同様の量の9-cis-レチノールを蓄積します。ただし、HEP G2細胞は、全トランスおよび9-CIS-レチノールの等モル濃度が提供されたときに、すべてのトランスレチノールを優先的に組み込みました。対照的に、HSC-T6細胞は、同じ条件下で全トランスと9-Cis-レチノールの間で好みを示さなかった。9-cis-レチノールのエステル化は、おそらくアシルCoA：レチノールアシルトランスフェラーゼとレシチン：レチノールアシルトランスフェラーゼによって、両方の細胞タイプで発生しました。in vitro酵素アッセイは、両方の細胞タイプがレチニルエステル加水分解酵素を介して9-cis-レチニルエステルを加水分解できることを実証しました。HEP G2細胞では、9-cis-レチノ酸合成が高濃度の9-cis-レチノールによって強く阻害され、マウスの肝臓の9-cis-レチノールの低レベルを説明する可能性があります。HEP G2の細胞ホモジネートは、すべてのトランス - レチノールを9-cis-Retinalに変換することができ、オールトランス - レチノールの遊離型が9-cis-レチノールの源として使用される可能性があることを示唆しているため、9-cis-レチノイン酸合成。私たちの研究は、特殊な組織における9-cis-レチノ酸の生成のための追加の経路の識別の基礎を提供します。

Retinoids function through conformational alterations of ligand-dependent nuclear transcription factors, the retinoic acid receptors, and retinoid X receptors. 9-cis-Retinoic acid is a known biological ligand for retinoid X receptors, but its synthesis pathway in vivo is largely unknown. Recently, we identified a cis-retinol dehydrogenase (cRDH) that oxidizes 9-cis-retinol to 9-cis-retinal. Since both the expression of cRDH mRNA and its substrate are found in liver, we studied 9-cis-retinol metabolism and 9-cis-retinoic acid biosynthesis in two hepatic-derived cell types, Hep G2 hepatoma cells and HSC-T6 stellate cells. Both cell lines accumulate similar amounts of 9-cis-retinol provided in the medium. However, Hep G2 cells preferentially incorporate all-trans-retinol when equimolar concentrations of all-trans- and 9-cis-retinol were provided. In contrast, HSC-T6 cells did not exhibit a preference between all-trans- and 9-cis-retinol under the same conditions. Esterification of 9-cis-retinol occurred in both cell types, likely by acyl-CoA:retinol acyltransferase and lecithin:retinol acyltransferase. In vitro enzyme assays demonstrated that both cell types can hydrolyze 9-cis-retinyl esters via retinyl ester hydrolase(s). In Hep G2 cells, 9-cis-retinoic acid synthesis was strongly inhibited by high concentrations of 9-cis-retinol, which may explain the low levels of 9-cis-retinol in liver of mice. Cell homogenates of Hep G2 can convert all-trans-retinol to 9-cis-retinal, suggesting that the free form of all-trans-retinol may be used as a source for 9-cis-retinol and, thus, 9-cis-retinoic acid synthesis. Our studies provide the basis for identification of additional pathways for the generation of 9-cis-retinoic acid in specialized tissues.