新規ポリエチレンイミンベースのポリマーによってコーティングされた表面上の神経細胞の培養

培養中の細胞を維持することは、細胞生物学と生理学の多くの側面を研究するために不可欠です。細胞培養は、成長表面への細胞の適切な固定に依存しています。ほとんどの細胞株、特にミトーシス後のニューロンの場合、コーティングされた組織培養プレートは播種の前提条件です。最も一般的に使用されるコーティング試薬は、ポリ-L-リジンなどのポリティブ帯電ポリマーまたはコラーゲンなどの生物学的に精製された接着分子です。このレポートでは、合成と細胞培養表面のコーティングのための簡単な手順を提示します。試薬は、生物学的に不活性な疎水性ポリエチレンイミン（PEI）であり、神経系統の系統を含む培養細胞株に適切な接着特性を提供します。疎水性PEIは、PEIのアミノ基の2 mol％に結合したオクタデカニル基によって分岐したPEIです。水溶性であるネイティブPEIとは異なり、修飾されたPEIはエタノールに可溶であり、したがって生物学的媒体の溶解に耐性があります。コーティングのプロトコルは、組織培養プレート、ガラス表面用に最適化されており、多くの点で、このポリマーは他の日常的に使用されるコーティング試薬よりも優れていました。ポリマー処理された表面にメッキされた神経細胞株は、繰り返しの培地の変更や広範な洗浄などの操作に耐性があります。他の一般的に使用されているコーティング試薬と比較して、開発されたPEIベースのポリマーとのコーティング表面の利点について説明します。

Maintaining cells in culture is essential for studying many aspects of cell biology and physiology. Cell culturing is dependent on proper anchorage of cells to the growth surfaces. For most cell lines, and especially for post-mitotic neurons, coated tissue culture plates are prerequisite for seeding. The most commonly used coating reagents are positively charged polymers such as poly-L-lysine or biologically purified adhesive molecules such as collagen. In this report, we present a simple procedure for synthesizing and for coating cell culture surfaces. The reagent is a biologically inert hydrophobized polyethyleneimine (PEI), which provides adequate adhesive properties for cultured cell lines including those of neuronal lineage. The hydrophobized PEI is branched PEI modified by octadecanyl groups bound to 2 mol% of the amino groups of the PEI. Unlike the native PEI that is water soluble, the modified PEI is soluble in ethanol, and thus resistant to solubilization in biological media. The protocol of coating was optimized for tissue culture plates as well as glass surfaces and in many respects this polymer outperformed other routinely used coating reagents. Neuronal cell lines, plated on the polymer-treated surfaces are resistant to manipulations including repeated media changes and extensive washing. The advantage of coating surfaces with the developed PEI-based polymer compared to other commonly used coating reagents is discussed.