マウス精巣におけるオリゴデンドロサイト特異的タンパク質/クローディン11の発現の発達的およびホルモン調節

精巣の前駆細胞幹細胞の高度に特殊な生殖細胞（精子）への増殖と分化は、主にセルトリ細胞を支持する隣接する隣接するホルモン（FSHおよびテストステロン）によって主に制御されます。ただし、この制御に関与する要因はほとんど不明のままです。本研究では、微分ディスプレイPCRの手法を使用して、培養マウスセルトリ細胞のFSH作用に対する標的転写産物を特定しました。これらの標的転写産物の中で、クローディン11としても知られるオリゴデンドロサイト特異的タンパク質（OSP）を特定しました。私たちのデータは、OSPの精巣発現が男性のgonad発達と全身性および局所シグナル伝達分子に依存していることを示しています。実際、OSPは、SRY（性決定領域、Y遺伝子）発現のピークの直後に、抗ミュラホルモンの直前に、セルトリ細胞の胎児発達の初期に発現しています。出生後、OSPの表現は3日目から増加して、6日目から16日目の出生後にプラトーに到達し始めます。思春期前および成体の精巣では、おそらく生殖細胞の数が増えているため（OSPを発現しない）、OSPメッセンジャーRNA（mRNA）レベルの明らかな低下が見つかりました。精巣のOSP発現を制御するシグナル伝達分子の中で、FSHおよび腫瘍壊死因子α（TNFALPHA）を特定しました。実際、精製された培養マウスセルトリ細胞のモデルを使用して、FSHが用量（ED50 = 4 ng/ml）および時間（24時間後の最大効果）依存的にOSP mRNAのレベルで阻害することを実証します。このような阻害効果は、8-ブロモキャンプによって模倣され、FSHがcAMP/プロテインキナーゼを使用してOSP mRNAレベルを阻害する可能性があることを示唆しています。TNFALPHAは、培養セルトリ細胞におけるOSP発現を阻害することも示されました。4.5 ng/mLのED50で48時間のTNFALPHA処理後に最大効果が観察されました。一緒に、我々の結果は、OSPの発現1）は、おそらくSRY制御下および精巣形成中に、胎児の生活中に始まることを示しています。2）成体精巣のホルモン（FSH）とサイトカイン（TNFALPHA）によって調節されており、精子形成中の造血障壁の（再）モデリングプロセスにおけるこれらの分子の重要な役割を示唆しています。

The proliferation and differentiation of testicular progenitor stem cells into highly specialized germ cells (spermatozoa) are largely controlled by the hormonally (FSH and testosterone) regulated adjacent supporting Sertoli cells. However, the factors involved in this control remain largely unknown. In the present study, the technique of differential display PCR was used to identify target transcripts to FSH action in cultured murine Sertoli cells. Among these target transcripts, we identified the oligodendrocyte-specific protein (OSP), also known as claudin 11, which had recently been shown to play a key role in the formation of the hematotesticular barrier. Our data show that the testicular expression of OSP is dependent upon male gonad development and systemic and local signaling molecules. Indeed, OSP is expressed early in fetal development in Sertoli cells, immediately after the peak of SRY (sex-determining region, Y gene) expression, but just before that of the anti-Mullerian hormone. Postnatally, OSP expression starts to increase from day 3 to reach a plateau between days 6 and 16 postnatally. In the prepubertal and adult testes, an apparent decline in OSP messenger RNA (mRNA) levels was found, probably because of the increasing number of germ cells (which do not express OSP). Among the signaling molecules that control testicular OSP expression, we have identified FSH and tumor necrosis factor-alpha (TNFalpha). Indeed, using a model of purified cultured mouse Sertoli cells, we demonstrate that FSH inhibits, in a dose (ED50 = 4 ng/ml)- and time (maximal effect after 24 h)-dependent manner, the levels of OSP mRNA. Such an inhibitory effect was mimicked by 8-bromo-cAMP, suggesting that FSH may use the cAMP/protein kinase A pathway to inhibit OSP mRNA levels. TNFalpha was also shown to inhibit OSP expression in cultured Sertoli cells. The maximal effect was observed after 48 h of TNFalpha treatment with an ED50 of 4.5 ng/ml. Together, our results indicate that OSP expression 1) starts during fetal life at a critical period, probably under SRY control and during testicular formation; and 2) is regulated by hormones (FSH) and cytokines (TNFalpha) in the adult testis, suggesting a critical role for these molecules in the (re)modeling process of the hematotesticular barrier during spermatogenesis.