ナトリウム依存性グルコース輸送体SGLT1による食事フラボノイドケルセチン4'-ベータ - グルコシドの細胞摂取4'-ベータ - グルコシド

腸のグルコース輸送体は、食事性フラボノイドグルコシドを積極的に吸収する可能性があることが示唆されていますが、このシステムによる輸送の直接的な証拠がないことが示唆されています。実際、腸吸収のヒトCACO-2細胞モデルを用いた以前の研究は、主要な食事性フラボノイドであるケルセチン4'-ベータ - グルコシドが、頂点に発現した多剤耐性関連タンパク質-2によって排出されることを示しました。吸収。この研究の目的は、ケルセチン4'-ベータ - グルコシドが腸のナトリウム依存性d-グルコースコトランスポーターSGLT1の基質であるという仮説をテストすることでした。ケルセチン4'-ベータ - グルコシドの細胞取り込みは、CACO-2細胞と安定してトランスフェクトされた中国のハムスター卵巣細胞（G6D3細胞）で検査されました。ケルセチン4'-ベータ - グルコシドはCACO-2細胞単層全体に吸収されませんが、間接蛍光顕微鏡検査と細胞含有量のHPLC分析により、頂端負荷後のこのグルコシドの細胞蓄積が明らかになりました。以前の観察と一致して、CACO-2およびG6D3細胞の両方におけるケルセチン4'-ベータ - グルコシドの蓄積は、多剤耐性関連タンパク質阻害の存在下で著しく増強されました。ケルセチン4'-ベータ - グルコシドの取り込みは、親の中国のハムスター卵巣細胞よりもSGLT1トランスフェクト細胞の方が大きかった。CACO-2およびG6D3細胞によるグルコシドの摂取はナトリウム依存性であり、一価イオノフォアニスタチンによって阻害されました。CACO-2およびG6D3細胞の両方で、ケルセチン4'-ベータ - グルコシドの取り込みは、30 mMグルコースと0.5 mMフロリジンによって阻害されました。これらの結果は、ケルセチン4'-ベータ - グルコシドが腸細胞の頂端膜を介してSGLT1によって輸送されることを初めて示しています。

Although it has been suggested that the intestinal glucose transporter may actively absorb dietary flavonoid glucosides, there is a lack of direct evidence for their transport by this system. In fact, our previous studies with the human Caco-2 cell model of intestinal absorption demonstrated that a major dietary flavonoid, quercetin 4'-beta-glucoside, is effluxed by apically expressed multidrug resistance-associated protein-2, potentially masking evidence for active absorption. The objective of this study was to test the hypothesis that quercetin 4'-beta-glucoside is a substrate for the intestinal sodium-dependent D-glucose cotransporter SGLT1. Cellular uptake of quercetin 4'-beta-glucoside was examined with Caco-2 cells and SGLT1 stably transfected Chinese hamster ovary cells (G6D3 cells). Although quercetin 4'-beta-glucoside is not absorbed across Caco-2 cell monolayers, examination of the cells by indirect fluorescent microscopy as well as by HPLC analysis of cellular content revealed cellular accumulation of this glucoside after apical loading. Consistent with previous observations, the accumulation of quercetin 4'-beta-glucoside in both Caco-2 and G6D3 cells was markedly enhanced in the presence of multidrug resistance-associated protein inhibition. Uptake of quercetin 4'-beta-glucoside was greater in SGLT1-transfected cells than in parental Chinese hamster ovary cells. Uptake of the glucoside by Caco-2 and G6D3 cells was sodium-dependent and was inhibited by the monovalent ionophore nystatin. In both Caco-2 and G6D3 cells, quercetin 4'-beta-glucoside uptake was inhibited by 30 mM glucose and 0.5 mM phloridzin. These results demonstrate for the first time that quercetin 4'-beta-glucoside is transported by SGLT1 across the apical membrane of enterocytes.