多微生物敗血症の免疫抑制：壊死（損傷）組織とエンドトキシンの役割

目的：最近の研究では、盲腸結紮と穿刺（CLP）によって生成される多微生物敗血症の発症後に見られる免疫機能障害は、エンドトキシン（ETX）のみによって引き起こされませんが、壊死組織（CECALライゲーション、[CL]）および他の微生物コンポネントの組み合わせ効果によって引き起こされる可能性があります。したがって、この研究の目的は、低用量エンドトキシンの存在下または非存在下で壊死組織の能力を評価し、免疫細胞の能力の変化を炎症誘発性または抗炎症性サイトカインをCLPで近似したものに近似したものに近似する能力を誘導することでした。 設計：実験的、前向き研究。 設定：外科研究センターの病院研究所。 被験者：雄C3H/ヘンマウス。 介入：マウスをCLおよび生理食塩水（CL/SAL）、CLと低用量ETX注入（CL/ETX）（0.025 mg ETX/25 g体重/24時間）と組み合わせて、腹膜浸透した浸透ミニポンプ）、ETX注入だけ、塩分単独（CLP）、CLP、またはSHAM-CLP。脾細胞、脾臓マクロファージ、および腹膜マクロファージは、上記のプロトコルにさらされた後、24時間（後期）から採取されました。脾細胞とマクロファージ誘導性サイトカイン放出は、ELISA/バイオアッセイによって評価されました。7日間の生存も追加のグループで調べられました。 測定と主な結果：我々の結果は、脾臓インターロイキン（IL）-2の著しい減少を示しています。さらに、腹膜または脾臓のマクロファージIL-6生産能力は、CL/ETXまたはCLPにさらされた動物の細胞で落ち込んでいた。あるいは、ClはETXの存在下または非存在下で、CLPで見られるマクロファージサイトカイン放出能力の著しい変化を誘導し、つまり、IL-12放出の減少とIL-10分泌の増加を誘導しました。これらの細胞の変化が死亡率の増加に寄与する範囲で、その後の生存研究では、CL単独もETXも死亡率を生成しないことを観察しました。ただし、CL/ETXの組み合わせにより、CLPと同程度ではありませんが、7日間の死亡率（約33％）が著しく増加しました（80％）。 結論：これらの結果は、CECALライゲーションによって生成された衰弱化された組織に対する反応が、宿主に抑制マクロファージの表現型の誘導の素因となる可能性があることを集合的に示唆しています。これらの動物の微生物剤へのその後の曝露は、免疫機能障害を誘発し、そのような多微生物敗血症の課題の後に見られる死亡率を誘発します。

OBJECTIVE: Recent studies suggest immune dysfunction seen after the onset of polymicrobial sepsis, as produced by cecal ligation and puncture (CLP), is not caused by endotoxin (ETX) alone, but may be caused by the combined effect of the necrotic tissue (cecal ligation, [CL]) and other microbial components. Thus, the objective of this study was to assess the ability of necrotic tissue, in the presence or absence of low-dose endotoxin, to induce changes in the capacity of immune cells to produce proinflammatory or anti-inflammatory cytokines approximating those seen in CLP. DESIGN: Experimental, prospective study. SETTING: A hospital laboratory in the Center for Surgical Research. SUBJECTS: Male C3H/HeN mice. INTERVENTIONS: Mice were subjected to a CL and saline infusion (CL/Sal), CL in combination with low-dose ETX infusion (CL/ETX) (0.025 mg ETX/25 g body weight/24 hrs by a peritoneally implanted osmotic mini-pump), ETX infusion alone, saline infusion alone (Sal), CLP, or sham-CLP (Sham). Splenocytes, splenic macrophage and peritoneal macrophage were harvested from these animals 24 hrs (late) after being subjected to the above protocols. Splenocyte and macrophage inducible cytokine release was assessed by ELISA/bioassay. Survival over a 7-day period was also examined in additional groups. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Our results indicate a marked decrease in splenic interleukin (IL)-2. In addition, peritoneal or splenic macrophage IL-6 productive capacity was depressed in cells from animals subjected to CL/ETX or CLP. Alternatively, CL, in the presence or absence of ETX, induced a marked change in macrophage cytokine release capacity comparable to that seen in CLP, ie, decreased IL-12 release and increased IL-10 secretion. To the extent these cellular alterations contribute to an increase in mortality rate, we observed in subsequent survival studies that neither CL alone nor ETX produced mortality. However, the combination of CL/ETX markedly increased 7-day mortality rate (approximately 33%), although not to the same extent as CLP (80%). CONCLUSIONS: These results collectively suggest that the response to devitalized tissue produced by cecal ligation may predispose the host to the induction of a suppressive macrophage phenotype. The subsequent exposure of these animals to microbial agents induces immune dysfunction, as well as mortality seen after such a polymicrobial septic challenge.