胆汁脂質の分泌のメカニズムI胆汁レシチンとコレステロールの合成と輸送における胆管およびミクロソーム膜の役割

胆汁脂質の合成と輸送における胆管およびミクロソーム膜の役割は、単離された灌流ラット肝モデルを使用して調査されました。標識レシチン前駆体（（3H） - パルミトン酸、（14C）リノール酸、（3H）コリン、および32PO4）およびコレステロール前駆体（（3H）メバロン酸）を、タウロコール酸ナトリウムとなしで投与しました。これらの標識前駆体の取り込みパターンは、リノリルおよびアラキドニルレシチンおよびコレステロール分画のミクロソーム、胆管、および胆汁のコレステロール画分を30分間隔で最大90分で調べました。マーカー酵素と電子顕微鏡は、原形質膜の分離されたサブフラクションに胆管が濃縮されていることが示されました（10％未満のミクロソーム汚染）。タウロコール酸塩は、90ミン研究期間中にマイクロソームおよび胆管膜の平行取り込み曲線を使用して、32PO4、（3H）コリン、（3H）パルミチン酸、および（14C）リノール酸のリノール酸の取り込みを有意に刺激しました。ただし、30〜60分間、胆汁中のこれらの同じレシチン画分は、膜レシチンの特定の活性を大幅に超えていました。酵素CDP-コリンジグリセリドトランスフェラーゼは、ミクロソームと比較してカナリキュリに実質的に存在していなかったため、カナリキュリはde novo lecithin合成の能力がないことを示しています。（3H）メバロン酸の膜性コレステロールと胆管コレステロールへの取り込みは、レシチンと同様のパターンに従いました。これらのデータは、（a）胆管レシチンとコレステロールが、腸肝胆汁酸のフラックスによって調節されるミクロソーム亜プールに由来するという証拠を提供します。（c）レシチンとコレステロールは、ミクロソームから胆汁に輸送されます。この所見は、肝細胞内の細胞質脂質複合体の存在と一致しており、これは胆管脂質の膜間輸送に積極的に関与しています。

The role of bile canalicular and microsomal membranes in the synthesis and transport of biliary lipids was investigated by using the isolated perfused rat liver model. Labeled lecithin precursors ((3H)-palmitic acid, (14C)linoleic acid, (3H)choline, and 32PO4) and a cholesterol precursor ((3H)mevalonic acid) were administered with and without sodium taurocholate. The incorporation pattern of these labeled precursors into linoleyl and arachidonyl lecithins and cholesterol fractions of microsomes, bile canaliculi, and bile were examined at 30-min intervals up to 90 min. Marker enzymes and electron microscopy indicated that isolated subfractions of plasma membranes were enriched with bile canaliculi (less than 10 percent microsomal contamination). Taurocholate significantly stimulated the incorporation of 32PO4, (3H)choline, (3H)palmitic acid, and (14C)linoleic acid into linoleyl and arachidonyl lecithin with parallel incorporation curves for microsomal and bile canalicular membranes throughout the 90-min study period. During the 30-60-min period, however, these same lecithin fractions in bile significantly exceeded the specific activity of the membrane lecithins. The enzyme CDP-choline diglyceride transferase was virtually absent from canaliculi relative to microsomes, indicating that canaliculi lack the capacity for de novo lecithin synthesis. Incorporation of (3H)mevalonic acid into membranous and biliary cholesterol followed a pattern similar to that for lecithin. These data provide evidence that (a) biliary lecithin and cholesterol are derived from a microsomal subpool regulated by the flux of enterohepatic bile acids, (b) the role of the bile canalicular membranes with respect to biliary lipids is primarily transport rather than synthesis, and (c) lecithin and cholesterol are transported together from microsomes to bile. The findings are consistent with the existence of a cytoplasmic lipid complex within the hepatocyte which is actively involved in the intermembrane transport of biliary lipid.