V2バソプレシン受容体遺伝子にナンセンス変異を抱えるマウスの生成と表現型

V2バソプレシン受容体（V2R）は、正常な体の水バランスの維持に重要な役割を果たします。腎機能におけるV2Rの役割の生理学的および分子分析を可能にするin vivoモデルを生成するために、マウス胚性幹細胞の標的変異誘発を使用することにより機能的V2Rを欠くマウス系統を作成しました。具体的には、マウスゲノムにヒト（Glu242stop）にX連鎖腎性糖尿病（XNDI）を引き起こすことが知られているナンセンス変異を導入しました。V2R欠損hemizygous雄の子犬は、基底尿浸透圧の減少を示し、尿を濃縮することができませんでした。これらの子犬はまた、腎骨盤宇宙の拡大を示し、繁栄できず、高ナトリオ系脱水のために出生後最初の1週間以内に死亡しました。興味深いことに、V2R変異のヘテロ接合性雌マウスは正常な成長を示しましたが、腎臓、ポリ尿、およびポリディピンシアの尿濃縮能力の低下を特徴とするXNDI様表現型を示しました。ウエスタンブロット分析と免疫電子顕微鏡研究により、機能性V2Rの喪失は、アクアポリン-2およびブメタニド感受性Na-K-2Clコトランポーター（BSC-1）の基礎発現レベルに有意な影響を及ぼさないことが示されました。ここで説明するV2R変異マウスは、XNDIの治療のための新しい治療戦略の開発のための非常に有用なツールとして役立つはずです。

The V2 vasopressin receptor (V2R) plays a key role in the maintenance of a normal body water balance. To generate an in vivo model that allows the physiological and molecular analysis of the role of V2Rs in kidney function, we have created mouse lines that lack functional V2Rs by using targeted mutagenesis in mouse embryonic stem cells. Specifically, we introduced a nonsense mutation known to cause X-linked nephrogenic diabetes insipidus (XNDI) in humans (Glu242stop) into the mouse genome. V2R-deficient hemizygous male pups showed a decrease in basal urine osmolalities and were unable to concentrate their urine. These pups also exhibited an enlargement of renal pelvic space, failed to thrive, and died within the first week after birth due to hypernatremic dehydration. Interestingly, female mice heterozygous for the V2R mutation showed normal growth but displayed an XNDI-like phenotype, characterized by reduced urine concentrating ability of the kidney, polyuria, and polydipsia. Western blot analysis and immunoelectron microscopic studies showed that the loss of functional V2Rs had no significant effect on the basal expression levels of aquaporin-2 and the bumetanide-sensitive Na-K-2Cl cotransporter (BSC-1). The V2R mutant mice described here should serve as highly useful tools for the development of novel therapeutic strategies for the treatment of XNDI.