ヘパラン硫酸プロテオグリカンの認識を通じて内皮細胞のRGD依存性接着を促進する樹状細胞関連膜貫通タンパク質DC-HILの分子クローニング

XS52樹状細胞（DC）系統および表皮ランゲルハンス細胞によって豊富に発現された新規分子（DC-HIL）を分離しましたが、他の細胞株によって最小限になりました。DC-HILは、ヘパリン結合モチーフとその細胞外ドメイン（ECD）にインテグリン認識モチーフRGDを含むI型膜貫通タンパク質です。ECDの可溶性融合タンパク質（DC-HIL-FC）と内皮細胞株（SVEC）の表面に結合した免疫グロブリンFc。この結合は、SVECの固定化された形態への接着を誘発しました。硫酸化多糖（例：ヘパリンやフコイダン）は、可溶性DC-HIL-FCの結合とSVECの接着を阻害しました。対照的に、インテグリン阻害剤（RGDSテトラマー）はSVECへの結合に影響を与えませんでしたが、SVECの接着を防ぎました。この微分RGD要件は、RGDモチーフを欠くDC-HIL-FC変異体がSVECに結合できるが、SVECの接着を誘発することができないという発見によって確認されました。さらに、DC-HILはこれらの硫酸化多糖類を直接認識しているようです。これらの結果は、DC-HILが内皮細胞上のヘパラン硫酸プロテオグリカンを認識することによりSVECに結合し、それによりRGD依存的にSVECの接着を誘導することを示唆しています。DC-HILは、DCの内皮移動に関与する可能性のあるDC関連のヘパラン硫酸プロテオグリカン依存性インテグリンリガンドとして機能することを提案します。

We isolated a novel molecule (DC-HIL) expressed abundantly by the XS52 dendritic cell (DC) line and epidermal Langerhans cells, but minimally by other cell lines. DC-HIL is a type I transmembrane protein that contains a heparin-binding motif and an integrin-recognition motif, RGD, in its extracellular domain (ECD). A soluble fusion protein (DC-HIL-Fc) of the ECD and an immunoglobulin Fc bound to the surface of an endothelial cell line (SVEC). This binding induced adhesion of SVEC to its immobilized form. Sulfated polysaccharides (e.g. heparin and fucoidan) inhibited binding of soluble DC-HIL-Fc and adhesion of SVEC. By contrast, an integrin inhibitor (RGDS tetramer) had no effect on binding to SVEC, but prevented adhesion of SVEC. This differential RGD requirement was confirmed by the finding that DC-HIL-Fc mutant lacking the RGD motif can bind to SVEC but is unable to induce adhesion of SVEC. Furthermore, DC-HIL appears to recognize directly these sulfated polysaccharides. These results suggest that DC-HIL binds to SVEC by recognizing heparan sulfate proteoglycans on endothelial cells, thereby inducing adhesion of SVEC in an RGD-dependent manner. We propose that DC-HIL serves as a DC-associated, heparan sulfate proteoglycan-dependent integrin ligand, which may be involved in transendothelial migration of DC.