ヒスタミンはホスホジエステラーゼ4活性を上方制御し、ヒト好中球のプロスタグランジンE2阻害効果を低下させる

目的：ヒスタミンがホスホジエステラーゼ（PDE）活性のアップレギュレーションを生成し、ヒト末梢血好中球に機能的な結果をもたらすかどうかを調査する。 方法：PDE活性は、アニオン交換クロマトグラフィー後の放射性同性法によって研究されました。逆転写酵素 - ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）を使用して、PDE4サブタイプのmRNA転写産物の検出に使用しました。環状AMP（cAMP）レベルは、酵素 - 免疫アッセイによって測定され、シトクロムCの減少によってスーパーオキシド生成が測定されました。 治療：好中球をヒスタミン（1 microM）と4時間インキュベートしました。 結果：PDE4は、処理された好中球で増加する唯一のアイソザイム活性でした。速度論的分析では、km値を変えることなくVMAXが約1.5倍増加しました。処理された細胞のcAMP含有量は、安静時値よりも高かった（0.52 +/- 0.07対2.75 +/- 0.31 pmol/10（6）細胞）。RT-PCRは、ヒスタミン治療細胞におけるPDE4bのmRNA転写産物の発現の増加を示しました。機能的には、PDE4のアップレギュレーションは、Zymosan誘発性スーパーオキシド生成のプロスタグランジンE2による阻害を減少させました。 結論：ヒスタミンはPDE4活性をアップレギュレートし、ヒト好中球の異種脱感作を引き起こします。

OBJECTIVE: To investigate whether histamine produces up-regulation of phosphodiesterase (PDE) activity with functional consequences in human peripheral blood neutrophils. METHODS: PDE activity was studied by a radioisotopic method following anion-exchange chromatography. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for detection of mRNA transcripts of PDE4 subtypes. Cyclic AMP (cAMP) levels were measured by enzyme-immunoassay, and superoxide generation by cytochrome c reduction. TREATMENT: Neutrophils were incubated for 4 h with histamine (1 microM). RESULTS: PDE4 was the only isoenzyme activity increased in treated neutrophils. Kinetic analysis showed a approximately 1.5-fold increase in Vmax without alteration of Km values. cAMP content in treated cells was higher than resting values (0.52+/-0.07 vs. 2.75+/-0.31 pmol/10(6) cells). RT-PCR showed increased expression of mRNA transcripts for PDE4B in histamine-treated cells. Functionally, up-regulation of PDE4 reduced the inhibition by prostaglandin E2 of zymosan-induced superoxide generation. CONCLUSION: Histamine up-regulates PDE4 activity and produces heterologous desensitisation of human neutrophils.