サルモネラTyphimuriumは、腸上皮全体にフラジェリンを移動させ、炎症性反応を誘発します

この研究では、可溶性パラクリン因子が偏光モデル腸上皮におけるサルモネラ誘発IL-8発現を媒介したかどうかを調査しました。サルモネラTyphimuriumにアピアルに感染していたモデル上皮の基底外側媒体（10分）が、Virginモデル上皮でIL-8分泌を活性化し、炎症誘発性因子（PIF）が実際に存在することを示していることがわかりました。初期の特性評価では、PIFは、IL-8分泌を誘発するために、基底外側ではあるが先端ではなく、頂端ではない表面に作用する約50 kDaの分子量を持つ熱安定性タンパク質であることがわかりました。PIFは、IL-8分泌（TNF-alphaまたはカルバコル）の他の誘導者とともに刺激されたモデル上皮の培地には存在しませんでしたが、S。typhimurium上清に存在し、PIFは細菌起源であることを示しています。PIFは、アニオン/陽イオン交換クロマトグラフィーとSDS-PAGEにより細菌培養上清から精製され、マイクロシーケンシングを使用してタンパク質鞭毛であることが発見されました。この発見を支持して、フラジェリン欠損S. Typhimurium変異体は、PIFの検出可能なレベルを分泌しませんでした（すなわち、モデル上皮に基底外に置かれたときにIL-8分泌を誘導する生物活性）。さらに、生存可能なフラジェリン欠損変異体生物（FLIC/FLJBおよびFLHD）は、腸上皮をモデルに添加するとIL-8分泌を誘発できませんでした。これらの発見は、頂端上皮Sに続く、上皮を横切る鞭毛の転座を示しています。Typhimuriumの相互作用は、粘膜炎症反応を活性化する主要な手段である可能性があります。

This study investigated whether soluble paracrine factors mediated Salmonella-induced IL-8 expression in polarized model intestinal epithelia. We found that the basolateral media of model epithelia that had been apically infected with Salmonella typhimurium for a short period (10 minutes) could activate IL-8 secretion in virgin model epithelia, demonstrating that a proinflammatory factor (PIF) was indeed present. Initial characterization found that PIF was a heat-stable protein with a molecular mass of about 50 kDa that acts on the basolateral, but not apical, surface of model intestinal epithelia to elicit IL-8 secretion. PIF was not present in the media of model epithelia stimulated with other inducers of IL-8 secretion (TNF-alpha or carbachol) but was present in S. typhimurium supernatants, indicating PIF is of bacterial origin. PIF was purified from bacterial culture supernatants by anion/cation exchange chromatography and SDS-PAGE and found by using microsequencing to be the protein flagellin. In support of this finding, flagellin-deficient S. typhimurium mutants did not secrete detectable levels of PIF (i.e., a bioactivity that induced IL-8 secretion when placed basolaterally on model epithelia). Furthermore, viable flagellin-deficient mutant organisms (fliC/fljB and flhD) failed to elicit IL-8 secretion when added apically to model intestinal epithelia. These findings indicate that translocation of flagellin across epithelia, subsequent to apical epithelial-S. typhimurium interaction, is likely a major means of activating a mucosal inflammatory response.