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受精には、接合体発達プログラムまたは「卵の活性化」の開始に必要な卵の急速かつ一時的なカルシウム放出が伴います。最近、SRCファミリーチロシンキナーゼ（SFK）依存性ホスホリパーゼC（PLC）活性が、肥料化されたアセノパス卵のカルシウムのトランシエンスに必要であることがわかった。本研究は、間接的な免疫蛍光研究で明らかにされたように、動物半球の卵子皮質で主に発生するアフリカツメガエル卵のタンパク質 - チロシンリン酸化を刺激することを示しています。卵SFKはH2O2によって上方制御されることがわかったが、SFK特異的阻害剤PP1はH2O2誘発チロシンリン酸化を効果的にブロックした。受精卵と同様に、PLCGAMMAは、SHCではなく、H2O2処理卵でチロシンリン酸化されていました。H2O2はまた、イノシトール1,4,5-三リン酸（IP3）産生と持続的なカルシウム放出を引き起こしました。H2O2の限定的な適用後、SFK活性の上昇とチロシンのリン酸化がすぐに逆転しました。そのような条件下で、卵は皮質収縮とp42 MAPキナーゼの脱リン酸化を示しました。どちらも卵の活性化を示しています。これらの卵の活性化イベント、およびH2O2誘発IP3産生およびカルシウム放出は、PP1およびPLC阻害剤U-73122に敏感でした。一緒に、本研究では、H2O2が少なくとも部分的には、SFK依存性PLC経路を必要とするアフリカツメガエル卵の活性化の初期イベントを模倣できることを実証しました。
受精には、接合体発達プログラムまたは「卵の活性化」の開始に必要な卵の急速かつ一時的なカルシウム放出が伴います。最近、SRCファミリーチロシンキナーゼ（SFK）依存性ホスホリパーゼC（PLC）活性が、肥料化されたアセノパス卵のカルシウムのトランシエンスに必要であることがわかった。本研究は、間接的な免疫蛍光研究で明らかにされたように、動物半球の卵子皮質で主に発生するアフリカツメガエル卵のタンパク質 - チロシンリン酸化を刺激することを示しています。卵SFKはH2O2によって上方制御されることがわかったが、SFK特異的阻害剤PP1はH2O2誘発チロシンリン酸化を効果的にブロックした。受精卵と同様に、PLCGAMMAは、SHCではなく、H2O2処理卵でチロシンリン酸化されていました。H2O2はまた、イノシトール1,4,5-三リン酸（IP3）産生と持続的なカルシウム放出を引き起こしました。H2O2の限定的な適用後、SFK活性の上昇とチロシンのリン酸化がすぐに逆転しました。そのような条件下で、卵は皮質収縮とp42 MAPキナーゼの脱リン酸化を示しました。どちらも卵の活性化を示しています。これらの卵の活性化イベント、およびH2O2誘発IP3産生およびカルシウム放出は、PP1およびPLC阻害剤U-73122に敏感でした。一緒に、本研究では、H2O2が少なくとも部分的には、SFK依存性PLC経路を必要とするアフリカツメガエル卵の活性化の初期イベントを模倣できることを実証しました。
Fertilization is accompanied by a rapid and transient calcium release in eggs, which is required for the onset of zygotic developmental program or 'egg activation'. Recently, it was found that Src family tyrosine kinase (SFK)-dependent phospholipase C (PLC) activity is necessary for the calcium transience in fertilized Xenopus eggs. The present study demonstrates that hydrogen peroxide (H2O2) stimulates protein-tyrosine phosphorylation in Xenopus eggs, which occurs primarily in the egg cortex of the animal hemisphere as revealed by indirect immunofluorescence study. Egg SFK was found to be upregulated by H2O2 while the SFK-specific inhibitor PP1 effectively blocked H2O2-induced tyrosine phosphorylation. As in fertilized eggs, PLCgamma, but not Shc, was tyrosine-phosphorylated in H2O2-treated eggs. H2O2 also caused inositol 1,4,5-trisphosphate (IP3) production and sustained calcium release. After limited application of H2O2, elevated SFK activity and tyrosine phosphorylation were quickly reversed. Under such conditions, eggs showed cortical contraction and dephosphorylation of p42 MAP kinase, both of which are indicative of egg activation. These egg activation events, as well as H2O2-induced IP3 production and calcium release, were sensitive to PP1 and PLC inhibitor U-73122. Together, the present study demonstrated that H2O2 can mimic, at least in part, early events of Xenopus egg activation that require an SFK-dependent PLC pathway.
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