原形質膜のSykのSH2ドメインを介したターゲティングではなく、局在化ではありませんが、fcepsilonriシグナル伝達にとって重要です

高親和性IgE受容体の凝集は、受容体のサブユニットのチロシンリン酸化と、その後のサイトゾルタンパク質チロシンキナーゼSykの受容体との関連性を誘導します。現在の実験では、SYKの膜結合の機能的重要性と、受容体を介したシグナル伝達におけるSH2ドメインの役割を調べました。アミノ末端でC-SRCミリスティル化配列を伴う野生型システムおよびキメラサイク分子は、syk陰性マスト細胞株で発現しました。ミリスティル化配列を伴うキメラサイクは膜関連であり、グリコリピッド濃縮マイクロドメインまたはラフトのFcepsilonri、Lyn、およびLAT（T細胞活性化のリンカー）と少量の画分を構成的に共局在させました。しかし、これらの条件下でさえ、Sykのチロシンリン酸化と信号の下流の伝播には、fcepsilonri凝集が必要でした。このキメラサイクは、fcepsilonriを介したシグナル伝達における野生型Sykよりもアクティブではありませんでした。対照的に、SH2ドメインを欠くSYKの切り捨てられた膜関連型は、受容体凝集によってチロシンリン酸化されず、細胞内シグナルの輸送に失敗しました。これらの発見は、SYKのSH2ドメインを介した膜移行が、ヒスタミン放出につながる下流のシグナル伝達イベントのためのSYKのFCEPSIPSILONRIを介した活性化に不可欠であることを示唆しています。さらに、グリコリピッド濃縮マイクロドメインにおけるSYKの局在自体だけでは、シグナル伝達イベントを生成または強化するには十分ではありません。

Aggregation of the high-affinity IgE receptor induces the tyrosine phosphorylation of subunits of the receptor and the subsequent association with the receptor of the cytosolic protein tyrosine kinase Syk. The current experiments examined the functional importance of membrane association of Syk and the role of the SH2 domain in receptor-mediated signal transduction. Wild-type Syk and chimeric Syk molecules with the c-Src myristylation sequence at the amino-terminus were expressed in a Syk-negative mast cell line. Chimeric Syk with the myristylation sequence was membrane associated, and a small fraction was constitutively colocalized with FcepsilonRI, Lyn, and LAT (linker for T-cell activation) in the glycolipid-enriched microdomains or rafts. However, even under these conditions, the tyrosine phosphorylation of Syk and the downstream propagation of signals required FcepsilonRI aggregation. This chimeric Syk was less active than wild-type Syk in FcepsilonRI-mediated signal transduction. In contrast, a truncated membrane-associated form of Syk that lacked the SH2 domains was not tyrosine phosphorylated by receptor aggregation and failed to transduce intracellular signals. These findings suggest that SH2 domain-mediated membrane translocation of Syk is essential for the FcepsilonRI-mediated activation of Syk for downstream signaling events leading to histamine release. Furthermore, the localization of Syk in glycolipid-enriched microdomains by itself is not enough to generate or enhance signaling events.