クローディン-2をマディンダービー犬腎臓I細胞に導入することにより、Zonulae Occludentesの緊密な鎖鎖のタイプに変換

MDCK細胞には2つの株、MDCK IとIIがあります。MDCK I細胞は、MDCK II細胞よりもはるかに高い横線維皮電気抵抗（TER）を示しますが、同様の数のタイトジャンクション（TJ）鎖を抱えています。これらの細胞におけるTJ鎖の主要成分であるClaudinsの発現パターンを調べました：Claudin-1と-4はMDCK IとII細胞の両方で発現しましたが、Claudin-2の発現はMDCK II細胞に限定されていました。次に、犬のクローディン-2 cDNAをMDCK I細胞に導入して、MDCK II細胞のクローディン発現パターンを模倣しました。興味深いことに、MDCK IクローンのTER値は、Claudin-2（DCL2-MDCK I）を安定に発現してMDCK II細胞のレベルに低下しました（20倍の減少）。対照的に、犬Claudin-3がMDCK I細胞に導入されたとき、TERに変化は検出されませんでした。マウス上皮細胞EPH4でも同様の結果が得られました。形態計測分析では、DCL2-MDCK IとMDCK I細胞を制御するTJの密度またはTJ鎖の数に有意差はありませんでした。これらの発見は、クローディン-2の添加により、個々のクローディン-1/4ベースのTJ鎖の緊張が著しく低下し、クローディン種の組み合わせと混合比が個々のTJ鎖のバリア特性を決定するという推測につながることを示しています。

There are two strains of MDCK cells, MDCK I and II. MDCK I cells show much higher transepithelial electric resistance (TER) than MDCK II cells, although they bear similar numbers of tight junction (TJ) strands. We examined the expression pattern of claudins, the major components of TJ strands, in these cells: claudin-1 and -4 were expressed both in MDCK I and II cells, whereas the expression of claudin-2 was restricted to MDCK II cells. The dog claudin-2 cDNA was then introduced into MDCK I cells to mimic the claudin expression pattern of MDCK II cells. Interestingly, the TER values of MDCK I clones stably expressing claudin-2 (dCL2-MDCK I) fell to the levels of MDCK II cells (>20-fold decrease). In contrast, when dog claudin-3 was introduced into MDCK I cells, no change was detected in their TER. Similar results were obtained in mouse epithelial cells, Eph4. Morphometric analyses identified no significant differences in the density of TJs or in the number of TJ strands between dCL2-MDCK I and control MDCK I cells. These findings indicated that the addition of claudin-2 markedly decreased the tightness of individual claudin-1/4-based TJ strands, leading to the speculation that the combination and mixing ratios of claudin species determine the barrier properties of individual TJ strands.