グルコース依存性インスリノトロピックポリペプチド（GIP）のアミノ末端における生物活性ドメインの同定

インキレチンは、グルコース依存的にインスリン分泌を増強するために内分泌膵臓に作用する小腸から放出されるホルモンのクラスです。活性のためのグルコース濃度の上昇が必要なため、インクレチン、グルコース依存性インスリノトロピックポリペプチド（GIP）およびグルカゴン様ペプチド-1は、非インスリン依存性糖尿病の治療に可能性があります。分子の生物活性ドメインを解明する目的で、一連の合成ペプチドGIPフラグメントが生成されました。ラット膵島GIP受容体をトランスフェクトした中国のハムスター卵巣細胞における環状AMP（cAMP）蓄積の刺激のためにペプチドをスクリーニングしました。テストされたGIPフラグメントのうち、GIP（1-14）とGIP（19-30）は、テストされた濃度の範囲（最大20ミクローム）にわたって最大のキャンプ刺激能力を示しました。対照的に、アミノ酸15-42、15-30、16-30、17-30に対応するGIPフラグメントはすべて、GIP（1-42）活性の弱い拮抗作用を示しました。競合結合変位研究により、これらのペプチドはGIP受容体の低親和性リガンドであることが示されました。in vivoでの生物活性を調べるために、麻酔中のラットでバイオアッセイが開発されました。GIPの静脈内注入（1-42）（1mol/min/100 g）と同時腹腔内グルコース負荷（1 g/kg）とインスリン放出の刺激を通じて循環血糖遠位が大幅に減少しました。高用量のGIP（1-14）とGIP（19-30）（100 pmol/min/100 g）も血糖遠位を減少させました。

The incretins are a class of hormones released from the small bowel that act on the endocrine pancreas to potentiate insulin secretion in a glucose-dependent manner. Due to the requirement for an elevated glucose concentration for activity, the incretins, glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP) and glucagon-like peptide-1, have potential in the treatment of non-insulin-dependent diabetes mellitus. A series of synthetic peptide GIP fragments was generated for the purpose of elucidating the bioactive domain of the molecule. Peptides were screened for stimulation of cyclic AMP (cAMP) accumulation in Chinese hamster ovary cells transfected with the rat islet GIP receptor. Of the GIP fragments tested, GIP(1-14) and GIP(19-30) demonstrated the greatest cAMP-stimulating ability over the range of concentrations tested (up to 20 microM). In contrast, GIP fragments corresponding to amino acids 15-42, 15-30, 16-30 and 17-30 all demonstrated weak antagonism of GIP(1-42) activity. Competitive-binding displacement studies indicated that these peptides were low-affinity ligands for the GIP receptor. To examine biological activity in vivo, a bioassay was developed in the anesthetized rat. Intravenous infusion of GIP(1-42) (1 pmol/min/100 g) with a concurrent intraperitoneal glucose load (1 g/kg) significantly reduced circulating blood glucose excursions through stimulation of insulin release. Higher doses of GIP(1-14) and GIP(19-30) (100 pmol/min/100 g) also reduced blood glucose excursions.