リン脂質に結合するミトコンドリアクレアチンキナーゼは、膜の流動性を低下させ、赤縁の励起シフト、ラウダン蛍光、およびFTIRによって監視される新しい脂質誘発ベータ構造を促進します

ミトコンドリアクレアチンキナーゼ（MTCK）の飽和および不飽和リン脂質への結合によって誘導される構造修飾は、環境の極性に敏感な膜プローブであるラウダンを使用して監視されました。脂質単独の相転移に特徴的な急激な変化は、MTCKの添加により弱められました。一般化された偏光スペクトルは、MTCK表面結合がリン脂質の液結晶状態をより硬い状態に変化させることを示しました。脂質の赤外線スペクトルはこれらの結果をさらに強化しました。MTCK結合により、リン脂質メチレン鎖は、同じ温度でMTCKなしで観察されたものよりも硬直した立体構造を持っていました。DiristoylphosphatidylCholineおよび非鼓腸のディミリストイルホスファチジルグリセロールの小胞に結合した後、外側相の分離は観察されず、両方の脂質が硬化したことを示唆しています。さらに、リポソームに結合したMTCKは、19 nmの珍しい赤縁の励起シフトを示しましたが、可溶性酵素の赤縁の励起シフトはわずか6 nmでした。これらの結果は、一部のMTCKトリプトファン残基の環境が運動的に制限されていることを示しています。熱変性に対する酵素構造の強い安定化が脂質結合時に観察されました。さらに、脂質は、新しい1632-cm（ - ）（1）ベータシートの形成を伴うアルファヘリックス比のベータシートのわずかな変更を示す赤外線データによって証明されるように、新しい可逆的タンパク質間相互作用を促進しました。可溶性タンパク質1636-cm（ - ）（1）1の代わりに。このような修正は、ミトコンドリア膜の流動性の減少を誘発することで、小胞凝集に役割を果たす可能性があります。それらは、内部ミトコンドリア膜と外部ミトコンドリア膜の間の接触部位の外観に関係する可能性があります。

Structural modifications induced by the binding of mitochondrial creatine kinase (mtCK) to saturated and unsaturated phospholipids were monitored by using Laurdan, a membrane probe sensitive to the polarity of the environment. The abrupt change characteristic of a phase transition of lipids alone was attenuated by addition of mtCK. Generalized polarization spectra indicated that mtCK surface binding changed the phospholipid liquid-crystalline state to a more rigid state. Infrared spectra of lipids further strengthened these results: upon mtCK binding, the phospholipid methylene chains had a more rigid conformation than that observed without mtCK at the same temperature. After mtCK binding to vesicles of perdeuterated dimyristoylphosphatidylcholine and nondeuterated dimyristoylphosphatidylglycerol, no lateral phase separation was observed, suggesting that both lipids were rigidified. Moreover, mtCK bound to liposomes exhibited an uncommon red edge excitation shift of 19 nm, while that of the soluble enzyme was only 6 nm. These results indicated that the environment of some mtCK tryptophan residues was motionally restricted. Strong stabilization of the enzyme structure against heat denaturation was observed upon lipid binding. In addition, lipids promoted a new reversible protein-protein or protein-lipid interaction, as evidenced by infrared data showing a slight modification of the beta sheet over alpha helix ratio with formation of a new 1632-cm(-)(1) beta sheet instead of the soluble protein 1636-cm(-)(1) one. Such modifications, inducing a decrease in the fluidity of the mitochondrial membranes, may play a role in vesicle aggregation; they could be implicated in the appearance of contact sites between internal and external mitochondrial membranes.